小中大按照Lz的说法,结合我们这边的经验分析,认为应该是转膜的问题的。38kd的目的蛋白,为什么要120v转1h。很是不明白LZ是根据什么条件选择的这样的转膜条件。
跟大家分享下,我们的做法。半干转的话,1KD转1min,以此类推,15v。湿转的话。12v过夜。
另外,没有条带的原因还有蛋白样品存放时间过长或者反复冻融次数过多造成蛋白降解、上样量太少,蛋白量低于检测抗体的检测低限、洗涤时间过长、抗体效价过低和加入显色底物和观察曝光结果的间接时间过长等等,都会造成无条带的现象。
以上仅供LZ参考。