小中大很羡慕楼上,弱信号仍能压出清晰的条带。我觉得我的条带荧光觉得已经比较强了,反而没有做出来,很是郁闷。
荧光淬灭的事情我很好奇。因为昨天做的好好的,突然拿镊子夹起来膜,把ECL液体用滤纸吸走的时候,突然发现条带看不见了。。。以前做没这样过哦。。不知道各位有没有遇到过类似的情况。
还有就是我买碧云天的东西,每瓶50ml,AB液,总共好像是285还是258。可能跟楼上的说的不完全一样。
谈谈我自己曝光的感觉。条带荧光强,压片的时间就相应缩短,我一般很强的就压30s,然后延长时间,条带很弱的话,就压片时间久点甚至压24个小时,呵呵,因为条件所限,没有暗室,只能每天晚上把PCR室占用了。。。
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有荧光却没有做出来,是因为荧光淬灭吗?如果不是那胶片是否曝光,显影剂是否失效呢?
你所提到的荧光淬灭我也遇到过,有时不小心将盖PVDF膜的保鲜膜掀起,荧光就会突然淬灭,而有时候即使将PVDF膜夹起,荧光也不会淬灭。我觉得可能还是跟二抗浓度,二抗与底物反应时间以及当时的反应条件有关。
我们用的发光剂是中杉金桥的,也是AB液,每瓶50ml,还不错
太佩服你的耐心了,24个小时也压过,强!