【求助】为什么高分子量的蛋白用低浓度的分离胶... - 经验共享

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标题:【求助】为什么高分子量的蛋白用低浓度的分离胶...

ending[使用道具]
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发表于 2013-5-17 10:40 资料个人空间短消息加为好友

小中大

据我理解，1-DE中的胶条是等点聚焦的过程，是根据不同蛋白质等电点不同而将其分开的，和胶的孔径没关系吧

tianmei001[使用道具]
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发表于 2013-5-17 10:40 资料个人空间短消息加为好友

小中大

请问43kda的蛋白用多少的胶比较好啊？还有电泳和转膜的时间。谢谢。

dongdongqiang[使用道具]
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发表于 2013-5-17 10:41 资料个人空间短消息加为好友

小中大

43KD 的蛋白用10%的分离胶和4%的浓缩胶，70V电泳，转膜250mA 3小时。

966735obeng[使用道具]
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发表于 2013-5-17 10:42 资料个人空间短消息加为好友

小中大

请问43kda的蛋白用多少的胶比较好啊？还有电泳和转膜的时间。谢谢。

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我以前做的是用12%的分离胶，5%的积层胶，120的Marker，湿转的话70V，55-60min就可以啦

gogo[使用道具]
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发表于 2013-5-17 10:43 资料个人空间短消息加为好友

小中大

蛋白分子量为45KDa，应该选用多大浓度的分离胶啊？还有，我的内参是GAPDH，杭州贤至的，分子量是37KDa，请问这个可以吗？谢谢了啊！ 0票

uuooii[使用道具]
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发表于 2013-5-17 10:43 资料个人空间短消息加为好友

小中大

原理大概看懂了但是多少kd用多少的胶还是木有什么概念啊

NBA[使用道具]
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