蛋白质与蛋白组学

但个人认为并不全面，如果封闭仅仅是填补空隙的话，那封闭仅仅是起到降低背景的作用。如果是这样的话杂带的问题怎么解释呢？还有免疫组化的封闭是怎么个原理呢？个人觉得从抗原决定簇的角度来说可能会更好一点。抗体是识别抗原决定簇，然后与之结合，奶粉和BSA起封闭作用主要是通过蛋白起作用的，就是能够非特异性地将表面的抗原决定簇结合，这样特异性的抗体就不会跟这些非特异性的抗原决定簇结合，这样背景就会降低。可能有人会问，那目的蛋白为什么不能被封闭掉？因为抗体跟目的蛋白的结合是非常特异的，结合能力很强，封闭之后依然能够结合。当然如果封闭是太长，也能影响抗体的特异性结合，导致最后显影信号变弱，这就是有时候封闭时间长了信号变弱的原因。同样，通过延长封闭时间来去除非特性条带以及免疫组化中延长封闭时间降低背景都是这么个原理。
个人拙见，不知道说没说清楚，不对之处欢迎指正

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说的很好，只是有疑问，中间有句“目的蛋白的结合是非常特异的，结合能力很强，封闭之后依然能够结合”，请问：
如果封闭蛋白与非特异性位点结合，也可以与特异性位点结合。那么特异性位点结合后，特异性位点就没有位点或空间与特异性抗体蛋白结合了。抗体与目的蛋白结合力再强，又如何结合呢？？？已经没有了位点和空间，如何结合？？难道会像磁铁一样有穿透性吗？？不会吧……

还是不明白封闭的道理……请继续解释！！

不过呢，如果一抗是羊源的抗体，一定要用BSA，否则，奶粉中的很多成分可以被羊源抗体识别，只能得到黑膜。

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我用的就是牛奶，没有你说的现象。