蛋白质与蛋白组学

您好，版主。我现在做唾液淀粉酶糖基化与非糖基化，以WB分离二者，一个56kD，一个62kD；膜是0.45的PVDF膜。再次请教您下转膜的方法，您上次推荐的是湿转、10V过夜转，那请问这个过夜有没有个时间范围？再一个，我之前以100mA、2.5h，有没有可能转过头（marker很淡、胶考R250染未见残余）？dying 4 ur immediate reply！！！

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时间范围 8h~14h左右吧，不过以100mA、2.5h，不大可能转过头，但是您说的 “marker很淡、胶考R250染未见残余” 这种情况很难解释了

您好！我想请教您关于检测蛋白质的乙酰化和甲基化的具体方法，看了文献感觉它的意思是先用一个乙酰化抗体把蛋白质沉淀下来再用该蛋白的抗体对沉淀下来的蛋白进行western检测，但是具体操作还是不懂
谢谢！

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1、用乙酰化抗体进行沉淀的话相当于是一个用抗体对相应抗原的富集过程
2、沉淀的产物用来进行WB检测
3、具体的操作第一步要了解IP的过程，第二步是做WB检测
搜一些关于IP的protocol吧

您好！
我在Western blot实验过程中发现某蛋白X在细胞内和细胞外蛋白的分子量不一致，细胞内有两条蛋白带，而分泌到细胞外后则只有一条蛋白带。
现在推测：
（1）X蛋白在向细胞外分泌过程中发生了蛋白质翻译后的去修饰，比如磷酸化和乙酰化。
（2）X蛋白在向细胞外分泌过程中蛋白质发生了发生了截断。
那么通过什么手段可以知道蛋白条带1和蛋白条带2之间的变化：蛋白序列变化、蛋白修饰变化。

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这个蛋白存在修饰情况吗？

这个蛋白存在修饰情况吗？

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有文献报道，此蛋白存在乙酰化修饰，而且位点不止一个。