小中大有一张胶图请您指教一下,是不是因为上样量太高才跑的这么烂啊。我跑的是植物蛋白,4-7的24cm胶条,上了1500μg样品,考染。期盼您的指导。
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你的图没有跑开, 展现的点也不多, 所以无法判断你的是什么植物蛋白, 24cm胶条, 上样1.5mg并不算多, 你看下图是我们一个粗样本提取物上了3mg的, 18cm胶条展现的(因为上样量太大, 所以有些地方成团了)。这里粗略的分析下sangyl 战友的图谱:
1. 24cm的胶因为面积很大, 所以相对于18cm的胶展现的点有时候会相对来说比较少点, 你的蛋白质点在整个图上等电点方向和分子量方向上分布比较的均匀, 所以1向选择的4-7的胶条和2向的胶浓度是没问题的而且肯定是经过精心选择的。
2. 虽然背景不深, 但是你的点并不是很SHARP, 分离的也不好, 不知道是否有经过TCA-丙酮沉淀? 这个步骤是做植物蛋白的推荐步骤。
3. 感觉聚焦不是很足, 可能需要调整下梯度过程和总的聚焦的伏小时, 应该能得到更好的展现。