蛋白质与蛋白组学 » 讨论区 » 经验共享 » 【求助】有没有人愿意讨论--酵母双杂交技术

采购询价

点击提交代表您同意 《用户服务协议》 《隐私政策》

 15  2/2 ‹‹12
 
需要登录并加入本群才可以回复和发新贴
打印 | 推荐 | 订阅 | 收藏

标题:【求助】有没有人愿意讨论--酵母双杂交技术

mod=8048[使用道具]
三级
Rank: 3Rank: 3


UID 73531
精华 0
积分 307
帖子 294
信誉分 100
可用分 2306
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-9-24
状态 离线
11

发表于 2013-5-27 16:16 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

Protein Interaction Databases
cuturl('http://www.hgmp.mrc.ac.uk/GenomeWeb/prot-interaction.html')
顶部
guagua[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 72040
精华 2
积分 732
帖子 1016
信誉分 104
可用分 5955
专家分 20
阅读权限 255
注册 2011-9-3
状态 离线
12

发表于 2013-5-27 16:17 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

个人认为，这篇文章或许能带给大家一些思考。

cuturl('http://www.pubmedcentral.gov/articlerender.fcgi?tool=pubmed&pubmedid=12587032')
顶部
sunnyB[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 77335
精华 0
积分 581
帖子 862
信誉分 100
可用分 5059
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-11-16
状态 离线
13

发表于 2013-5-27 16:17 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
各位同道，我现在在作双杂交。我用一种钙诱导的分子伴侣为诱饵（无自激活转录活性），从一个人脑文库（预转化的文库）中用mating方法筛选其parter。双杂交系统为clontech matchmaker 3。我想把我碰到的问题与大家讨论。我用四缺SD培养基共得到300多个阳性克隆。在从酵母抽提质粒后行AD library 通用引物行PCR扩增，屡屡失败，我用的是玻璃珠加STES裂解液。请教你们用什么方法抽提质粒？

希望得到帮助！
顶部
mod=8048[使用道具]
三级
Rank: 3Rank: 3


UID 73531
精华 0
积分 307
帖子 294
信誉分 100
可用分 2306
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-9-24
状态 离线
14

发表于 2013-5-27 16:17 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

个人以为，问题不是出在“抽提质粒”上，我用菌落PCR也做的出，分析一下PCR条件吧。另外，假阳性问题考虑了没有？
顶部
kswl870[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 77250
精华 0
积分 559
帖子 755
信誉分 101
可用分 4621
专家分 10
阅读权限 255
注册 2011-11-15
状态 离线
15

发表于 2013-5-27 16:19 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
我也正在作双杂交，现在刚把诱饵基因转到酵母菌里。希望和大家共同讨论。
顶部
 15  2/2 ‹‹12