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标题:【求助】丽春红染色出事了。。

kuaizige[使用道具]
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1 丽春红一般是在转膜后封闭前染的,封闭后整张膜都是蛋白,一片红色,当然看不出来
2 染色时只要一加染色液,稍微晃动几十秒就可以,倒掉染色液,用水洗两次就可以看到条带
3 丽春红染的条带在去垢剂下可以洗掉,所以染色后加入封闭液就可以把染上的颜色洗掉
4 无论是NC膜还是PVDF膜都可以用丽春红染色
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9900[使用道具]
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不要误导别人!!!
封闭的牛奶与转膜的蛋白结合完全不同,所以即使是封闭后,转移的蛋白条带仍然能够用丽春红染色,经过我多次试验证实的!
虽然隐约记得PVDF膜也能用丽春红染色,但因为长时间不用PVDF膜了,不是很确定,希望有人来确证一下。

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非常同意,封闭PVDF膜或NC膜,封闭的主要是膜上未结合蛋白的位点,还不足以封闭掉蛋白条带。
染完看不见,可能因为上样量较小或者配方的问题。丽春红染色的灵敏度跟考染没法比,更不用说跟化学发光显影了。
PVDF膜如果放干了后,可以用甲醇再活化一下,然后再用丽春红染
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taoshengyijiu[使用道具]
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pvdf能染
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ROSE李[使用道具]
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封闭以后的PVDF膜也是可以用丽春红染的!
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applebook=213[使用道具]
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考马斯亮蓝是不可逆的,所以染膜可惜了。

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PVDF考染后可以用甲醇洗去G250, 重新封闭上抗体基本不影响效果
NC膜用甲醇洗后容易破碎,没有实用价值。
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ukonptp[使用道具]
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丽春红染色会对蛋白有一定伤害,如果有把握可以不染的
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