蛋白质与蛋白组学 » 讨论区 » 经验共享 » 【讨论帖】个人的详细实验过程关于蛋白可溶表达与纯化

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标题:【讨论帖】个人的详细实验过程关于蛋白可溶表达与纯化

kuaizige[使用道具]
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发表于 2013-6-1 13:32 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
辛苦了lz，谢谢分享。
不知道你在蛋白纯化出来后是如何定量的?
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abc816[使用道具]
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发表于 2013-6-1 13:32 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

Amp，终浓度为100g/mL？

笔误了吧，ug/ml
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lagua123[使用道具]
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发表于 2013-6-1 13:33 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

写的不错，要是能把前面如何构建质粒开始，就更完美了。
不知道楼主要纯化蛋白的目的是做什么
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misswu61[使用道具]
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发表于 2013-6-1 13:33 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
23℃ 90rpm 30h

不知道LZ为什么选择90RPM，而不和上面的一样呢？
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发表于 2013-6-1 13:34 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

非常感谢楼主，本人也是做纯化蛋白的菜鸟，在做了一个月仍无法有效增加蛋白可溶性后，看到了此贴，准备按照楼主的思路做一遍，希望成功，也会将过程结果拿来共享，谢谢
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ALALA[使用道具]
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发表于 2013-6-1 13:34 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

楼主，你好！我也是一个新手，正在纯化蛋白，但是每次纯化后都有一条和目的蛋白稍小的杂带。
我使用的载体也是pET32a，但是我带有蛋白自己的终止密码子，请问是什么原因呢？
谢谢！
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