【求助】为什么marker只跑出三条带？ - 经验共享

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标题:【求助】为什么marker只跑出三条带？

huifeng0516[使用道具]
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发表于 2013-6-1 15:55 资料个人空间短消息加为好友

小中大

我的实验条件和楼主基本相同，我的胶是12％，但是每次只有三条带，不知什么原因，结果有一天一看日期，唉，已经过期两年了，难怪啊。哈哈。

vera+[使用道具]
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发表于 2013-6-1 15:55 资料个人空间短消息加为好友

小中大

我也曾经碰到同样的问题，郁闷了好长一段时间，最后换amersham就好了！

am10[使用道具]
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发表于 2013-6-1 15:56 资料个人空间短消息加为好友

小中大

我遇到过和你一样的问题，蛋白标准品也是买自中科院上海生化研究所，我们的电泳系统也是Biol-Rad的。我把标准品的浓度增大了一倍，结果原先没有跑出的高分子量和低分子量蛋白条带都跑出来的，我用的电压是60伏。

bs4665[使用道具]
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发表于 2013-6-1 15:56 资料个人空间短消息加为好友

小中大

我们开始做western跑胶时也是Marker跑不全，7条带一般只有5条带，但后来一次偶然的机会发现，跑胶时间短些，溴芬兰大约只跑了整个胶长度的2分之1时考马斯亮兰染色出现了清晰的7条带，所以认为太小的marker条带跑久了就不见了（原因未知）！不能说是小条带跑的超过了溴芬兰，因为7条带都在溴芬兰后面，真是怪，不过实践出真知！你们也试试看！

vera+[使用道具]
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发表于 2013-6-1 15:56 资料个人空间短消息加为好友

小中大

直觉告诉我ZJhan的经验对大家有很大的应用价值，大家可以按其所述试试。因为我用的多肽分子量marker低于6kb的3条带全不见了，但是这些带不会全跑到溴芬兰之前。也是莫名其妙消失了，不过我一直没办法解决。但是我因为跑得是Tricine－SDS－PAGE，时间特别长，要3－5h，所以为我觉得ZJhan的方法可能会解决我的问题。

yjf1026[使用道具]
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发表于 2013-6-1 15:58 资料个人空间短消息加为好友

小中大

我们也遇到过这种情况，marker只有3条带，跟别的实验室用的条件和试剂都一样，把别人的marker拿来跑也只出3条带，后来找到原因了，是胶的浓度配稀了，我相信这是主要原因，提高胶的浓度，我想一定会出的。

DONT[使用道具]
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发表于 2013-6-1 15:59 资料个人空间短消息加为好友

小中大

我用8%的分离胶跑PARP的活化形式（89 kD）和PARP的酶原（116 kD）,marker只有6条带（正常有10条带），我用的是fermentas 的预染marker 0671，那我是否也可以用12%的胶试试吧？

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