小中大谢谢前辈。
请问叠氮钠需要加多少量呢?
另外请问前辈,不用奶粉封闭是不是直接加用TBST的一抗孵育?不需要先牛奶封闭1小时+一抗孵育过夜?因为我的一抗是用加在5%脱脂奶里面的。
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叠氮钠一般加0.02%就可以了,一抗有叠氮钠的情况下洗膜时间要加倍,防止残留的NaN3导致二抗失活
奶粉里有磷酸化蛋白(主要是磷酸酪氨酸)和磷酸酶, 前者会提高背景,后者会减弱原本的信号,所以不要用
可以试试5%BSA封闭1小时后用TBST冲一下,加一抗过夜