不同的上样量对实验结果有影响吗？

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标题:[未解决]不同的上样量对实验结果有影响吗？

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mico_11[使用道具]
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发表于 2013-6-22 21:22 资料个人空间短消息加为好友

小中大

因为做凝胶电泳时发现10微升的上样量，水溶性蛋白和碱溶性蛋白跑出的条带很整齐，而盐溶性蛋白的条带上窄下宽，这是不是因为浓度大的原因（或许是我拔梳子时把胶弄断了）？不同的上样量对实验结果有影响吗？

花花[使用道具]
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发表于 2013-6-22 21:22 资料个人空间短消息加为好友

小中大

如果只是为了证明你的样品中是否有没有某种蛋白，那就可以不一样；如果你要比较不同样品中蛋白质的变化情况，就必须保证待电泳的样品中蛋白质中蛋白含量一样或者说你上样的里面应该是蛋白质总量是一致的。所以很多时候我们上样前都会测蛋白质浓度。

读过书的[使用道具]
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发表于 2013-6-22 21:26 资料个人空间短消息加为好友

小中大

不太懂这个啊，个人观点，如果只是定性，问题应该不大，不过上样量的差别，会造成条带差异

fantacy[使用道具]
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发表于 2013-6-22 21:32 资料个人空间短消息加为好友

小中大

是定性的，这个差异是指条带的颜色深浅差异吧？如果是的话那就没问题了

hey_bye[使用道具]
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发表于 2013-6-22 21:37 资料个人空间短消息加为好友

小中大

可以不同的，我以前也做过类似的实验，只要保证每种蛋白的色谱带既能分开又清晰就可以了

青青子衿[使用道具]
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发表于 2013-6-22 21:47 资料个人空间短消息加为好友

小中大

差异就是深浅粗细差异
不大，我们做的是20微升都可以的，

兜兜[使用道具]
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发表于 2013-6-22 21:50 资料个人空间短消息加为好友

小中大

无论定性还是定量。不同处理方式，加的量一致，且条带尽量分开就行。

mr.henry[使用道具]
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发表于 2013-6-22 21:55 资料个人空间短消息加为好友

小中大

最好得一直，不然你跑出来的效果不好，可比较性没有了。尤其适合标准蛋白的比较，相当于标准蛋白是废品了都。所以建议最好是一样的。

娜爷~[使用道具]
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发表于 2013-6-22 21:58 资料个人空间短消息加为好友

小中大

不明白你的“不同上样量”的定义，是指mol数还是体积数？
如果是定性的话（看到底有没有），上样量区别不大
定量的话，就一定要相同了

小书虫[使用道具]
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发表于 2013-6-22 22:03 资料个人空间短消息加为好友

小中大

定量就一定要求每孔达到蛋白上上样量相同，也就是要先测定样品中的蛋白浓度，上样体积可以不同，蛋白浓度要相同。

蛋白质与蛋白组学

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标题:[未解决] function setanswer(pid){ if(confirm("您确认要把该回复选为“最佳答案”吗？")){ document.delpost.action='misc.php?action=bestanswer&tid=231594&pid=' + pid + '&bestanswersubmit=yes'; document.delpost.submit(); } } 不同的上样量对实验结果有影响吗？

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