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标题:[未解决]不用冷冻干燥直接加热做凝胶电泳不行吗？

  [未解决]本主题悬赏 可用分 10  
差不多先生[使用道具]
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发表于 2013-6-23 10:41 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

不用冷冻干燥直接加热做凝胶电泳不行吗？

如果说蛋白质提取过程中和冷冻干燥要保持低温是为了防止蛋白质变性，那么干燥的后的粉末是不是可以室温保存，反正最后凝胶电泳前是要加热变性的？或者进一步可以说提取后的溶液不用冷冻干燥直接加热做凝胶电泳不行吗？这中间蛋白质的变化会有什么影响？
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孤独的渔夫[使用道具]
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发表于 2013-6-23 10:42 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
如果你不测样品的其他活性的话 应该在常温下保存是可以的 而提取后的溶液不用冷冻干燥直接加热做凝胶电泳不好吧 那样你怎么知道样品浓度呢 只有进样量适当、样品制备良好 跑出来的样才漂亮呢 个人愚见
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敬候佳音[使用道具]
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发表于 2013-6-23 10:50 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
sds-page加缓冲液使蛋白变性跟你样品常温保存是两码事，样品保存条件看你自己的实验目的，做活性研究的肯定要放在低温下，在一个就是保存时间，长时间的也要放在低温。如果你的样品当天用以后就不要了，那你放常温没问题
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倾轻地[使用道具]
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发表于 2013-6-23 10:54 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
想问您一下，就是用0.1mol/L的磷酸盐提水溶蛋白做SDS-PAEG要不要脱盐？不透析脱盐的话对其电泳影响大吗？盐溶蛋白是用含1.1mol/L的NaCl提取的，干燥后含盐量很大，这个必须得脱盐吧？
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雨儿[使用道具]
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发表于 2013-6-23 10:58 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
如果样品磷酸盐浓度太高会对SDS-PAGE有一定影响 盐浓度大的话，是要脱盐的
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