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标题:[未解决]做酶活测定方面的高手,我的实验设计有问题吗?

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美丽婷婷[使用道具]
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做酶活测定方面的高手,我的实验设计有问题吗?

我要从柚皮中提取果胶,现在有个问题是,要事先灭酶,防止提取过程中果胶酶分解果胶,降低产率。我想通过测定酶活的方法,确定沸水灭酶时间,实验设计是这样的:
1)沸水一定时间,取1g灭酶后柚皮粉末2份,各加纯水5mL,标号1、2;
2)充分震荡两管,1号立即过滤或离心,取上清液1mL,加DNS0.75mL后,沸水浴10分钟,稀释成5mL,测520nm处吸光值;2号90度水浴半小时后,过滤或离心,取上清液1mL,操作同上
按道理,果胶酶没有灭活的话,后边的吸光值应该要大的,但是测定效果不好,而且几乎没什么重复性。
请教一下,做酶活测定方面的高手,我的实验设计有问题吗?
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双_视野[使用道具]
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果胶里面还原糖用什么氧化剂可以去除而不会破坏果胶?
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莫莫莫[使用道具]
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前面正好见过有人做,测定中最好先离心,要不标准曲线都是不好做的,测得数据很不稳定。
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千里之外[使用道具]
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你的柚皮粉末都灭酶了,2号管也没有加酶液,怎么会有果胶酶的影响?
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