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标题:[未解决]大家在做多糖纯化，如何进行洗脱方式的选择？

  [未解决]本主题悬赏 可用分 10  
千里之外[使用道具]
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发表于 2013-6-23 11:43 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

大家在做多糖纯化，如何进行洗脱方式的选择？

请教一下，大家在做多糖纯化，如何进行洗脱方式的选择？例如，在摸索纯化多糖时，我先用纯水进行洗脱，再进行Nacl洗脱，浓度范围为0-1mol/L进行洗脱，那么，问题是，如何确定纯水洗脱体积和Nacl溶液的洗脱体积？
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grace![使用道具]
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发表于 2013-6-23 11:44 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
不知道你是用什么方式纯化？是上凝胶柱么？
用柱子的话我先用缓冲液洗，一般洗至少一个半柱体积，再用含NaCl的缓冲液梯度洗脱，至少要让不同浓度的洗脱液都过了柱子才行，除非你知道大概的能够洗脱下来的盐浓度~
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发表于 2013-6-23 11:47 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
你这个问题问的呀，，，

关体积什么事呀？

纯水过渡到氯化钠，是氯化钠的浓度在变化的···
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hero_b[使用道具]
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发表于 2013-6-23 11:50 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
多糖的纯化要是过柱子那是要累死个人，而且纯化样品产率很低。建议用分级醇沉得方法进行纯化，这样快而且产率高，24小时就能搞定，要是过柱子最少要几个月。
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迷糊小鬼[使用道具]
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发表于 2013-6-23 11:57 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
你用的是纤维素柱吧，流速为四秒一滴，装柱后，先用蒸馏水平衡10h左右，上样，蒸馏水洗脱1000ml,再分别用0.05、0.1、0.3、0.5MNacl洗脱1000ml，确定最大组分，以后就可少量洗脱
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apple_danny[使用道具]
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发表于 2013-6-23 12:01 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
我做的金钱草多糖，用胃蛋白酶解，然后过凝胶柱，可不知道该怎么收集，PS：先出来的是氨基酸吧？后洗脱出来的是多糖？？怎么洗脱？怎么收集，求高人指点啊、
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today@[使用道具]
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发表于 2013-6-23 12:06 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
朋友你好，请教你个问题，DEAE纤维素柱一般分离多糖时的吸附载量大概多少啊，我要用到DEAE Sepharose fast flow分离多糖，不知道该用多少填料，1ml填料大概能吸附多少糖呢？
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未完~待续[使用道具]
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发表于 2013-6-23 12:10 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
很讨厌过柱子，柱子效率低，为什么没有又快有好，而且产量大的手段，这样能做很多有意思的实验
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80年代的人[使用道具]
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发表于 2013-6-23 12:13 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
装柱的时候你怎么确定装柱的量呢（是指纤维素的量），谢谢
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be!smile[使用道具]
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发表于 2013-6-23 12:18 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
分级醇沉也只是把纯度提提吧，如果要是想得粉末那样的纯的可以吗？
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