食品分析者 » 讨论区 » 分析百问 » 有谁做过小麦醇溶蛋白的酸性电泳？求助！

采购询价

点击提交代表您同意 《用户服务协议》 《隐私政策》

 
需要登录并加入本群才可以回复和发新贴
打印 | 推荐 | 订阅 | 收藏

标题:[未解决]有谁做过小麦醇溶蛋白的酸性电泳？求助！

  [未解决]本主题悬赏 可用分 10  
mr.henry[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 108006
精华 0
积分 982
帖子 1124
信誉分 100
可用分 1339
专家分 0
阅读权限 255
注册 2013-4-27
状态 离线
1

发表于 2013-6-25 09:57 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

有谁做过小麦醇溶蛋白的酸性电泳？求助！

有谁做过小麦醇溶蛋白的酸性电泳，分离胶、浓缩胶的配比是多少，还有样品是如何处理的，参考了一些文献，我做了两个星期了，也没做出结果，急切，求助！
顶部
娜爷~[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 108007
精华 0
积分 982
帖子 1143
信誉分 100
可用分 1455
专家分 0
阅读权限 255
注册 2013-4-27
状态 离线
2

发表于 2013-6-25 09:58 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
样品浓度是否合适，建议采用样品浓度梯度的方法选一个最佳的样品浓度或上样量
顶部
小书虫[使用道具]
五级
Rank: 5Rank: 5


UID 106593
精华 0
积分 1604
帖子 1947
信誉分 100
可用分 2530
专家分 0
阅读权限 255
注册 2013-4-1
状态 离线
3

发表于 2013-6-25 10:00 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
胶浓度是否合适，主要是分离胶浓度要合适；浓缩胶对于结果影响不大，有些人不用浓缩胶也能跑出很好的条带
顶部
outeer[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 108008
精华 0
积分 997
帖子 1173
信誉分 100
可用分 1566
专家分 0
阅读权限 255
注册 2013-4-27
状态 离线
4

发表于 2013-6-25 10:02 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
提取过程是否合适，建议在查阅一些文献资料。
电泳试验是一个慢慢摸索的过程，有时候出现了问题需要不断的实验找出原因，再多实验几次，看看效果。
这方面的文献资料也挺多，重点关注一些关于电泳条件方面的文章。
顶部
冰@舟[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 108009
精华 1
积分 985
帖子 1146
信誉分 102
可用分 1554
专家分 0
阅读权限 255
注册 2013-4-27
状态 离线
5

发表于 2013-6-25 10:05 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
给你一篇参考文献参考：cuturl('http://www.doc88.com/p-47249501721.html')
顶部
XXXX111[使用道具]
五级
Rank: 5Rank: 5


UID 106688
精华 1
积分 1524
帖子 1864
信誉分 102
可用分 2397
专家分 0
阅读权限 255
注册 2013-4-3
状态 离线
6

发表于 2013-6-25 10:07 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
我看过这篇文献了，但样品提取液2-氯乙醇貌似有剧毒，我用了乙二醇提取，再加入含有甲基绿的甲酸溶液，别的也差不多，就是没有加入剥离硅胶，所以胶不好剥，但关键是没有条带跑出啊，只有最上面的一个宽条带。
顶部
差不多先生[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 108010
精华 0
积分 951
帖子 1081
信誉分 100
可用分 1340
专家分 0
阅读权限 255
注册 2013-4-27
状态 离线
7

发表于 2013-6-25 10:09 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
把分离胶的浓度降低,跑出的条带是什么样的？是在靠近上样一侧，还是在最前端啊？如果在靠近上样一侧，那么胶浓度大了；如果在最前端，胶浓度小了。
顶部
孤独的渔夫[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 108011
精华 0
积分 967
帖子 1094
信誉分 100
可用分 1310
专家分 0
阅读权限 255
注册 2013-4-27
状态 离线
8

发表于 2013-6-25 10:12 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
开始用10%分离胶，是在泳道的最前端，降低分离胶浓度时，看到整个泳道有跑过的痕迹，但看不到条带。不知道你说“如果在靠近上样一侧，那么胶浓度大了；如果在最前端，胶浓度小了。”是什么原理呢？
顶部
敬候佳音[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 108013
精华 0
积分 948
帖子 1075
信誉分 100
可用分 1388
专家分 0
阅读权限 255
注册 2013-4-27
状态 离线
9

发表于 2013-6-25 10:15 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
降低分离胶浓度时，看到整个泳道有跑过的痕迹，但看不到条带,这可能是上样量太大造成的，蛋白没有完全分开
如果在靠近上样一侧，那么胶浓度大了；如果在最前端，胶浓度小了；这句话可以这样理解：当分离胶浓度大时，所有蛋白质都不能通过分离胶，那么它们就会全部积聚在上样一侧，当分离胶浓度大时，所有蛋白质都通过了分离胶，没有分子筛的作用，所以蛋白质都在分离胶的最前端。
不知道你理解了吗？如果不清楚找本生化实验书再看看，呵呵！
顶部