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标题:[已解决]HPLC谱图怎样算漂亮

  [已解决]本主题悬赏 可用分 20  
sugar-tang[使用道具]
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HPLC谱图怎样算漂亮

请问各位前辈,HPLC谱图怎样算是漂亮?我做根、茎、叶中黄酮化合物含量测定,但不同部位含量差距很大,这样是不要对样品进行不同倍数的稀释。下面是谱图,麻烦各位大虾帮我分析分析,看看能不能用。如果样品峰面积都超过了标准曲线的是否要稀释到标准曲线浓度范围内才行呢?


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2010-1-6 21:42
CK2 根.jpg (55.97 KB)
 
2010-1-6 21:42
CK2 茎.jpg (55.05 KB)
 
2010-1-6 21:42
CK2 叶.jpg (52.08 KB)
 
2010-1-6 21:42
汉黄芩素标准品.jpg (52.37 KB)
 
2010-1-6 21:42
黄芩苷标准品.jpg (52.14 KB)
 
2010-1-6 21:42
黄芩素标准品.jpg (56.19 KB)
 
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  • miracle   2010-1-6 22:55  可用分  +1   已有朋友回复您的问题!
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maicaixiaogu[使用道具]
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2最佳答案
 
1)分析条件基本上还可以,建议使用梯度洗脱的条件,不仅可以缩短分析时间,且可提高后面组分的灵敏度,是定量更准确。如果仪器没此功能就算了。可以适当提高流动相中有机溶剂的比例,使后边成分的分析更方便,这样就需要两种分析条件了。

2)样品前处理的方法要根据初步试验的结果调整提取、稀释倍数,使目标成分的峰面积落在一个比较适宜的范围,理论上说要在定量限以上,线性范围以内,习惯上大约在吸光度0.005-0.2之间比较合适,在你的仪器上大概相当于峰高在0.5-20单位(万微伏)吧?
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  • miracle   2010-1-7 09:43  专家分  +3   谢谢您提供详细帮助!
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entd_jps[使用道具]
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3
 
如果楼主不想重新做,可以调整一下谱图的坐标,让y轴大一些,把最大的峰包进来。

从下面的几张图看,你的样品中待测物质的浓度并不是很大,可以根据这次测的计算一下样品中待测物质的浓度,适当降低标样浓度重新做一下。
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  • miracle   2010-1-6 22:55  可用分  +3   谢谢您的热心应助!
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tiger-icp[使用道具]
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理想的峰,峰形用尖,对称,
但是你也别做的太好了,这样看起来比较假,
看你的标准品的保留时间,你的样品里好像只有黄芩苷啊,
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  • miracle   2010-1-7 09:42  专家分  +2   感谢您的应助解答!辛苦了!
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q_r_epcnge[使用道具]
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样品的峰面积最好落在校正曲线的面积内,这样线性好点
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  • naren4545   2010-1-7 19:37  可用分  +2   谢谢您的参与!
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命运--ses[使用道具]
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峰面积要在线性内

你的图太多,没看懂要说明什么问题
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超过标准曲线限度,需要处理。或者稀释,或者增加标准曲线范围。
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出国吧[使用道具]
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如果你要的主成分峰都已经出来的话,还不错,不一定要稀释样品,你也可以把对照品深度提高。
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iwfi325iwc[使用道具]
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建议用梯度 分离效果会更好一点!!
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iTIANMING[使用道具]
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图还不错啊,浓度不算高。可能出峰有的比较晚,建议用梯度洗脱试试。
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