小中大cloner 的意思是:用一定的抗体可以识别有感染性的朊病毒,而没有感染性的不可被检测,是吗?不知这种说法是否有依据。从实验步骤看来这一步是技术关键。
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现在有很多针对PrP的抗体是不能区分两种不同的PrP(PrPC和 PrPSc)的,我手头看到的一篇文章说单抗15B3可以特异性识别PrPSc(Korth C, Stierli B, Streit P, Moser M, Schaller O, Fischer R, Schulz-Schaeffer W, Kretzschmar H, Raeber A, Braun U, Ehrensperger F, Hornemann S, Glockshuber R, Riek R, Billeter M, Wuthrich K, Oesch B. Prion (PrPSc)-specific epitope defined by a monoclonal antibody. Nature, 1997, 390(6655): 74-77)。
要判断是PrPC还是 PrPSc,其实可以利用PrPC和 PrPSc对PK(蛋白酶K)的不同抗性来区别,PrPC是不能抵抗PK的消化的,而PrPSc则可以部分抵抗,再利用抗PrP抗体来捕捉,判断是否有留下的PrP片断就可以知道是PrPC还是 PrPSc了。