请问会是什么原因导致几十万分子量的组分消失？

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标题:[未解决]请问会是什么原因导致几十万分子量的组分消失？

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=心晴=[使用道具]
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发表于 2013-7-28 23:12 资料个人空间短消息加为好友

小中大

转载
我做的是多糖的分离纯化，用的是DEAE SEPHAROSE FAST FLOW 填料，上样之前我会用做液相检测它的分子量，发现里边有几十万分子量的组分以及一万左右的组分，但是上柱子之后得到的级分检测分子量只有一万左右的，几十万分子量的级分消失了，请问会是什么原因导致几十万分子量的组分消失？是因为洗脱液强度太小？还是因为上样前多糖溶解时几十万分子量的组分因为分子量太大，溶解比较难而被离心留在沉淀里了？

不化妆的lay[使用道具]
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发表于 2013-7-28 23:12 资料个人空间短消息加为好友

小中大

你用的是NACL梯度洗脱么？如果是的，再用高浓度洗脱液冲，也许就会下来了

哦买噶[使用道具]
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发表于 2013-7-28 23:18 资料个人空间短消息加为好友

小中大

重复做下，试试定量分析，多糖容易断链的。多糖在氯化钠复溶后，离心分离还是不容易的。多糖分解的因素根据结构仔细查一下，排除一些降解因素

集贤阁[使用道具]
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发表于 2013-7-28 23:21 资料个人空间短消息加为好友

小中大

目前多糖分离的方法还是膜法比较成熟一些，凝胶分子筛分离我没有试过，因为，葡聚糖凝胶本身就是一种多糖结构。有结果及时分享，关注中。多糖在低浓度、水溶液中相对还是比较稳定的，酸碱条件，机械条件等等因素非常容易断链。

哈达[使用道具]
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发表于 2013-7-28 23:25 资料个人空间短消息加为好友

小中大

你的分离可以考虑用膜分离，分离动力用压缩空气，不要用泵，膜分级可以用一万，五万和十万三个级，用中空纤维膜，我以前做过。