小中大昨天做了tricine SDS_PAGE,没有AB-3,就用的Bio-Rad的30%的stock solutions,调整了一下用量.
Anode buffer: 0.2 M Tris-HCl, pH8.9
Cathode buffer: 0.1 M Tris, 0.1 M Tricine, 0.1% SDS, pH8.25
Gel buffer: 3.0 M Tris, 0.3% SDS, pH 8.45
Electrophoresis: 80V 30min, 200V 60min.
结果小分子量的条带很弥散,不只是什么原因?请楼主和高手指点迷津。图片做的不好,让大家见笑了。谢谢!
10% 分离胶 4% 积层胶
DDH2O 2.3 ml 3.36 ml
Gel buffer 3.3 ml 1.2 ml
AB ( 30% stock) 3.34 ml 0.67 ml
Glycerol(100%) 1 ml 0 ml
10% APS 50 μl 40 μl
TEMED 6 ul 5 ul