手性分析

问各位前辈一个关于液相冲柱子的问题
一般反相柱怎么冲柱子，开始做样？
如果做样是用的含乙腈为流动相，那么我们做样前就用10%的乙腈过一下在上流动相。做完样后也是先用10%的乙腈冲，最后用10%的乙腈饱和。这样做有不妥么？
今天我做手性，流动相为4ml水先溶于30ml异丙醇，再将此溶液与970ml正己烷相容，摇匀后静置5小时。且在做样过程中吸虑头不能放到底。我对此有疑问，既然怕吸虑头放到底会接触到水，但流动相中为什么要放水呢？更何况我们在做手性时是不应许有水的。
还有一个，就是关于这个手性做样，我们做样前跟做样后应怎么冲柱子？

希望高手能给与意见！！！

具体是什么类型填料的手性柱呢？不同手性柱，有不同要求的，这点需要时刻铭记于心。手性柱的流动相要求，柱温，最高耐受压力，哪些溶剂绝对不能进柱子等，这些都很重要的。在用手性柱之前，仔细研读柱子使用说明书啊，毕竟这东东贼贵，动不动就RMB 过 W。。。

至于微量水分对正相模式下手性分离的影响，虽有文献报导，但我们都坚决不用这么样的流动相条件，微量水分对在正相模式下使用的手性柱有不可逆损伤，刻意添加H2O作为洗脱调节剂，饮鸩止渴，无异于慢性自杀。个人强烈建议不用这样的流动相。

Peak Separation by Adventitious or Added Water in Normal-Phase Chiral HPLC
（Trace amounts of water improves separation in normal-phase chiral HPLC）
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共同学习，希望高手解答！

反相柱冲柱子的方法正如你说，过度流动相的冲洗时好习惯，封存柱子最好用高比例有机相封存。

正相自然是不要接触到水，这里的水可能起到萃取溶解的作用吧，异丙醇是溶于水的正己烷不溶，它在中间是过度溶剂，它也溶于正己烷，以不同比例分配在两相间。

用水饱和的溶剂，色谱柱稳定比较容易。

   空气中总是有水，用绝对干燥的流动相，会相对不稳定。会吸收空气中的水，造成分析不稳定。

什么叫绝对干燥的流动相啊？是指纯溶剂么？

谢谢您提供详细回复！ 高人！！

是缓冲作用吧？

有的文献使用水半饱和的正己烷做流动相。

硅胶柱。

色谱柱说明书中有说明储存液是什么吗？一般都直接用100%正己烷冲洗并保存在正己烷中。