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标题:【求助】酵母双杂交 实验流程问题 请多指教 ！

jkobn[使用道具]
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发表于 2013-8-16 16:26 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
我是新手，在此想请教各位问一个层次比较低的问题：酵母双杂交实验中的诱铒蛋白常是已知的，目标蛋白可能已知也可能未知，那么怎么获得目标蛋白和诱铒蛋白的DNA编码序列？是不是先要做PCR把目标，蛋白和诱铒蛋白的DNA编码序列扩增出来？
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发表于 2013-8-16 16:26 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
我马上就要做这个实验了，想请教一下各位，做这个实验之前要准备一些什么东西？是不是只要订一个酵母双杂交的试剂盒就可以了？还要不要订别的试剂盒？另，哪种试剂盒好用一些？谢谢！

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个人觉得，还是clontech的好。毕竟已经在酵母试验领域，先进了这么多年。我用的是 SMART lll 系。听说已经出来 SMART Gold了。你打听打听各个代理商吧。
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发表于 2013-8-16 16:27 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
我是新手，在此想请教各位问一个层次比较低的问题：酵母双杂交实验中的诱铒蛋白常是已知的，目标蛋白可能已知也可能未知，那么怎么获得目标蛋白和诱铒蛋白的DNA编码序列？是不是先要做PCR把目标，蛋白和诱铒蛋白的DNA编码序列扩增出来？

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在clontech网址上，可以下载一套适合刚刚接触酵母试验的 〈试验说明书〉。

我这次的Y2H试验，基本都是自己摸索，做出来的。
十分理解，刚刚开始时的迷茫/彷徨。

不要灰心，我相信，试验是有灵性的。功到自然成！！ 呵呵
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