手性分析

问下坛子里的老师，我想再用CE试试万古霉素，使其浓度为2mM、3mM、4mM，缓冲液想试磷酸二氢钾（50mM、）或Tris（50mM），pH为4、5、6。
我想加点有机改性剂，请问一般加多少？
缓冲盐能加到100mM吗？（我看有文献上是0.1M，挺大的）

当HPLC从反相过渡到正相系统时，需要用异丙醇过渡，过渡过程中，用两通代替色谱柱，待系统完全过渡好之后，装上色谱柱，就可以平衡、分析样品了。
不会发生压力大的问题。

前两天又试了OD-RH，用乙腈-水（100mM，KH2PO4，pH=2）=分开一点，分离度为0.6，因柱子至少需要10%的有机相，所以10：90的试了分离度也差不多。试了水-乙腈-异丙醇（85：14：1）一点都分不开了；水-乙腈-甲醇（85：14：1）没什么改进；又试了水-乙腈-甲醇（90：9：1）柱效超低；水-乙醇甲醇（90：9：1）不但柱效低还一点没分开；水-乙腈-乙醇（85：14：1）跟上面分叉的分离度差不多；水-甲醇-乙腈（85：14：1）不但柱效低还一点没分开。
话说这手性柱优化通过换缓冲盐还会有改进吗？

楼主可以寄样品到我们厂家，我们帮你分拆这些啊，我们柱子型号多，有环糊精、纤维素、血清蛋白等等。
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