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标题:分享:反相液相色谱中流动相pH的确定

maomi530[使用道具]
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分享:反相液相色谱中流动相pH的确定

反相高效液相色谱缓冲体系PH的选定

  反相高效液相色谱中缓冲体系PH值的选择在反相高效液相色谱分析中,选择正确的缓冲液PH值,对可离解的化合物分析的重现性十分重要,不恰当的PH值可能导致不对称峰,宽峰,分裂峰或肩峰,而尖锐的,对称的峰是定量分析中获得低的检测限以,两次分析之间较低的相对标准偏差(RSD)和保留时间的高重现性的前提。我们将讨论在使用缓冲液时如何选择缓冲液的PH值,以及如何选择正确的缓冲体系。

  什么时候需要缓冲溶液?

  在反相液相色谱分析中,流动相的PH值一般在2.5-7之间,当被分析物在反相条件下可离解,或样品的PH值在2.5-7之外时,就需要缓冲液。在反相条件下可离解的化合物一般都有氨基和羧基,他们的Pka在1-11之间,选择正确的缓冲液PH值可保证可离解的官能团以一种形式存在,离子形式或中性化合物的形式。如果样品的PH值对柱子有伤害,则缓冲溶液可使其变温和从而减小其危害。

  如何选择缓冲液PH值

  在选择缓冲液PH值之前,应先了解被分析物的Pka,高于或低于Pka两个PH值单位的,有助于获得好的、尖锐的峰,从HH公式:PH=Pka+log([A-]/[A])得知,溶液 PH值高于或低于Pka两个单位,化合物中99%以一种形式存在,而一种形式存在的化合物才能获得好的尖锐的峰。

  如果选择不到合适的,样品的pKa与流动相的pH非常接近,那么流动相pH微小的变化,都会引起样品保留时间较大的变动。

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技术含量较高,有实用,非常感谢!
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谢谢LZ
文章非常有价值  
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感谢,楼主提供了这么有价值的文章
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挺好的文献,有一定的启发
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谢谢
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说的很有道理。很想全都看完,哈哈!!
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谢谢楼主,发布的资料很实用
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又长知识了,谢谢~~
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长见识了,谢谢!顶
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