液相色谱

在做外标含量的时侯

你的序列是怎么设置的？

有没有什么文献有规定的？

下面是我的序列，恭请高手指导：

1.空白 进样1针
2.对照-1 进样5针
3.对照-2 进样1针
4.样品-1 进样2针
5.样品-2 进样2针

计算是：1.对照-1 5针的重复性 RSD<2%
                2.对照-1第五针于对照-2的样品称样误差 RSD<2%
                3.以对照-1计算样品含量

我这样设置序列有什么不妥的地方

计算呢？只以对照-1计算样品含量是否可行？

做液相时，本人没有接触到这么细的要求，也没有听说过这么细的规范要求。我都是先进对照品2针，后面就是样品了，每个样2针。楼主说的对照品连进5针，重复性？好像药典不是这样规定的吧，对照品连进6针，精密度。同一批样品相同处理方法5个样，每个样两针，重复性。

有楼主所说的那种做法，第一个对照品连续进5针，其余的都进两针，不能只进一针，如果样品多，分析时间长了，中间还要重新进对照品，看有没有变化。

先对照品再空白再样品

你那个对照品-2完全没有必要，楼主

这么设：
1.对照-1 进样5针；计算RSD，如果小于2%，序列继续，如果大于2，继续进对照-1，直至连续5针的RSD小于2
2.样品-1 进样2针
3.对照-1进1针
4.样品-2 进样2针
5.对照-1进一针
最后计算所有对照品-1的RSD应小于2%；然后根据对照-1的平均值计算两个样品的结果，两个样品计算结果之间的RSD小于2%，取其平均值。

注：没必要进空白，进空白是HPLC方法建立时需要做的（比如合理设置积分参数），如果在做定量的时候还搞不清空白是怎么回事，就太离谱了。

对照品双份，每份进五针，这是中检所的方法，主要是考察RSD

我们一般是对照、样品都是双份，对照品每份进3针，，样品每份进2针

计算是带入平均校正因子

首先算校正因子F=对照品取样量/对照品稀释体积*对照品峰面积
标示量的百分含量=F*样品峰面积*样品稀释体积*样品平均片重（或者装量）/样品取样量/标示量

补充下，，，F=对照品取样量除以对照品稀释体积和对照品峰面积的乘积

我们做时，如果是按中国药典检，就是先进5针对照1，计算RSD<规定值，
再进2针对照2，计算前7针的RF的RSD，
再样品做平行样，进两针，
若时间长，就每隔三小时进一针对照2。
进完样品后再最后进一次对照2，计算与前5针对照1的RF的RSD。

如果是按国外标准检的话，就是进6针对照1，其他的一样。

不管是国外还是中国药典，都是按对照1和对照2的平均RF来算含量的。

不明白楼主的
4.样品-1 进样2针
5.样品-2 进样2针
是同个样品做平行，共进4针吗？

受教了，谢谢！有感悟！

是同个样品做平行，共进4针，不知道有没有必要?

“同个样品做平行，共进4针”不行吧，这只能考察仪器误差，应该配两个样品，各进两针，才能包括整个方法的误差。

没有文献，有的话可能只能药检所的文件，这个做法都是药检所要求的。