蛋白质与蛋白组学 » 讨论区 » 经验共享 » 【讨论帖】我在SDS-PAGE中所犯的错误

采购询价

点击提交代表您同意 《用户服务协议》 《隐私政策》

 165  4/17 |‹‹‹234567891011›››|
 
需要登录并加入本群才可以回复和发新贴
打印 | 推荐 | 订阅 | 收藏

标题:【讨论帖】我在SDS-PAGE中所犯的错误

uaubc[使用道具]
三级
Rank: 3Rank: 3


UID 107981
精华 0
积分 451
帖子 562
信誉分 100
可用分 3661
专家分 0
阅读权限 255
注册 2013-4-27
状态 离线
31

发表于 2013-8-31 17:00 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

不好意思，请教AP是什么东西的缩写啊？（汗颜）
顶部
applebook=213[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 74101
精华 6
积分 525
帖子 405
信誉分 112
可用分 2981
专家分 60
阅读权限 255
注册 2011-10-5
状态 离线
32

发表于 2013-8-31 17:00 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

应该是过硫酸铵，但我知道另外有种缓冲液的缩写也是AP。
顶部
milkdog[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 79280
精华 0
积分 500
帖子 719
信誉分 100
可用分 4366
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-12-9
状态 离线
33

发表于 2013-8-31 17:37 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

1%琼脂粉封边很好用
顶部
lxh031[使用道具]
三级
Rank: 3Rank: 3


UID 76425
精华 0
积分 335
帖子 389
信誉分 100
可用分 2726
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-11-5
状态 离线
34

发表于 2013-8-31 17:39 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
我也是第一次做，我用的是BIO-RAD0.75mm,想请教大家加样时用什么东西加呢？用微量进样器吗？我把tip头前面加了个6号半针头可以伸到孔底，可是一加样就向两侧的孔溢出去，害得我每加一个样都要洗半天旁边的孔：（（
另外跑出来的条带总是有些歪斜，是什么原因呢？好的电泳跑的时候染料带是什么形状呢？
还有我用的12%的分离胶感觉看胶时很容易卷曲，不知道哪里出了问题。
谢谢各位指教啦。

我们用一种特殊的枪头，比10ul的长许多，专门用来加样的。
顶部
ii077345[使用道具]
三级
Rank: 3Rank: 3


UID 108893
精华 0
积分 247
帖子 193
信誉分 100
可用分 1734
专家分 0
阅读权限 255
注册 2013-5-15
状态 离线
35

发表于 2013-8-31 17:40 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

我可能见过的，也是白色的那种，有点像200微升的那么长是吗？
顶部
ritou1985[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 77664
精华 0
积分 644
帖子 948
信誉分 100
可用分 5596
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-11-19
状态 离线
36

发表于 2013-8-31 17:40 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

每次跑的时候，电压小点，时间长点，带就不会歪了。
顶部
veiwu[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 107977
精华 1
积分 513
帖子 662
信誉分 102
可用分 4122
专家分 10
阅读权限 255
注册 2013-4-27
状态 离线
37

发表于 2013-8-31 17:41 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
不好意思，请教AP是什么东西的缩写啊？（汗颜）

==========================

Ammonium Persulfate 过硫酸铵
顶部
yes4[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 77377
精华 0
积分 764
帖子 1145
信誉分 101
可用分 6575
专家分 10
阅读权限 255
注册 2011-11-16
状态 离线
38

发表于 2013-8-31 17:42 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
每次跑的时候，电压小点，时间长点，带就不会歪了。

=========================================================

那么请教你们一般电压是多少呢？我是在积层胶用8V/CM,分离胶用15V/CM
顶部
orangecake[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 77305
精华 0
积分 512
帖子 724
信誉分 100
可用分 4431
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-11-15
状态 离线
39

发表于 2013-8-31 17:43 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
请问我跑2DE时，横纹有点多，大分子蛋白很少，请问有什么解决方法呢，急！
顶部
idea2011[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 77656
精华 0
积分 552
帖子 783
信誉分 100
可用分 4726
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-11-19
状态 离线
40

发表于 2013-8-31 17:44 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
我做SDS-PAGE时用Bio－Rad的电泳槽，一直都很好用。但是用的时间长了有时会出现漏胶的现象。不过总体来说还是很好用的。很方便，但就是价格也很贵。关于AP我看还是现用现配，每次称100mgAP，加1ml水就行了。很麻烦吗？我觉得比拿出来解冻要省时间。其实SDS-PAGE做的好坏关键在于你的样品好坏。还是在制样上多花点心思比较好。至于加样的问题可以用微量进样器，要注意每次用完后洗干净，否则容易堵。有条件的话也可以买专门上样的枪头，200ul的那种，我们实验室有，很好用。
顶部
 165  4/17 |‹‹‹234567891011›››|