小中大我刚进实验室,近一周做SDS-PAGE时也遇到了头痛的问题:分离胶凝后总是双层,上层大约2mm;跑胶时在染色带前总出现一条很细的条带,不知是何缘故?
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我也遇到同样的问题。我认为这是上层密封液（水或饱和正丁醇）与下层胶的缓冲带，其中也含被稀释的胶液，因此也可聚合，但是因为浓度稀，聚合时间短而无法形成凝胶，只能形成一个折光系数不同的液相。一般我是如此解决，就是当估计下面已经完全聚合时，倒去上层密封用的饱和正丁醇或水，这时，上面那条细带也一起被倒掉了，然后用水冲洗，继续灌制浓缩胶即可。
此处的关键是一定不要聚合过长时间，否则，上面那条细带就也聚合成凝胶，而无法冲洗掉了。
哪位还碰到过这个问题，同时你又是如何解决的，大家一起讨论，看能否找出真正的原因和最佳解决方案。
