小中大标准曲线时,BSA是需要每次测定都要重新配制吗?
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各位师兄师姐,紧急求助,就是用考马斯亮蓝法测定土壤蛋白,但是不管是预实验还是正式试验,测定的结果并不相同,尽管重复了很多次,不知道问题出哪里了?忘各位师兄师姐帮帮忙。
1、标准曲线时,BSA是需要每次测定都要重新配制吗?在测样品的时候是直接加100ul待测样品,其他与标准曲线一样。
2、提取的土壤蛋白储存在4°冰箱中,放置一个礼拜左右,对测定结果有影响么?还是会有蛋白变性的可能性?还是提取完成后放置在-20°条件?
3、考马斯染液反应时间为10min,并在一个小时之内测定完成,这个时间是不是有问题?