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关于能看到荧光淬灭快的问题，我也碰到过多次，根据我自己的经验建议如下解决：
首先考虑底物的问题，这是最有可能发生的。就算这个底物上次使用没有问题，别人用也没有问题。也首选考虑换底物。另外需要注意的是已经使用过不好的底物的膜建议换底物也没有用。最好重新跑胶转膜。以下两条均在底物确认多次无问题的情况下实施。
然后考虑二抗的问题。重新换二抗或者稀释二抗的浓度。上样量减少。
对于局部荧光淬灭很有可能与您的操作如不干净的保鲜膜或者金属镊子碰到相关。
总之，遇到相关问题要积极探索，周全想到每一个环节。祝大家实验顺利。
