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标题:【求助】WB方面求助

kewanqi2011[使用道具]
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发表于 2013-10-10 17:28 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

b-actin也会降解吗？
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kewanqi2011[使用道具]
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发表于 2013-10-10 17:29 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
动物组织在-80度条件下能保存多长时间？
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jrwyyplt[使用道具]
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发表于 2013-10-10 17:29 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
条带连成条状师什么原因呢？谢谢1

================

上样量太多了。
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jrwyyplt[使用道具]
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发表于 2013-10-10 17:30 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
动物组织在-80度条件下能保存多长时间？

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起码半年到一年……反正我们实验室是这么干的……
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kewanqi2011[使用道具]
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发表于 2013-10-10 17:31 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

那保存时间超过了一年了影响大吗？我感觉都做得不怎么好了，调整也不好调整。相同的一批蛋白我第一次做BCA实验时标准曲线的R为0.9967，但是做出的b-actin不一致，有两个组相对较高，我怀疑我定量不准，隔了一天又定量了一次，R为0.9911，测出的数据变化不大，做出的条带和钱一次的还是基本一样，我以前也是这样定量，一做b-actin基本都一致了，可是这次新提的蛋白却出现这种结果，是不是组织放久了，出问题了？
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发表于 2013-10-10 17:31 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
β-arrestin2的分子量是多少啊？怎么说明书上显示的和p50的一样啊，那在做western blotting 的时候该如何确定啊？谢谢！

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应该是50KD。
你也做这个蛋白吗？用的哪家的抗体呢？效价怎样？特异性好吗？希望可以交流一下。
当然WB技术也可以讨论。
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kewanqi2011[使用道具]
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发表于 2013-10-10 17:32 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

Cell signaling，之前做了一下，条带很弱
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www.1[使用道具]
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发表于 2013-10-10 17:32 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
Cell signaling，之前做了一下，条带很弱

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CST的C16D9兔单抗？我之前也用的这个抗体，效价很差，郁闷。。。
你做的组织还是细胞？
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kewanqi2011[使用道具]
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发表于 2013-10-10 17:33 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

组织，而且存放了挺久了，所以现在都不怎么好做
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发表于 2013-10-10 17:33 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

换抗体或者提供新鲜样本做一次，并且降低一抗浓度
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