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标题:【讨论帖】蛋白版畅谈自己课题，欢迎参与

hulu呼噜[使用道具]
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发表于 2013-10-22 17:44 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

相关疾病：
急性肾衰竭
我也来说说：我的课题比较浅，主要是研究载脂蛋白M在急性肾衰大鼠的表达以及核因子-κβ对其表达的影响。研究方法：
1.Western-blotting测蛋白表达
2.Real time-PCR检测目的蛋白的mRNA表达
3.Dot-blotting检测血浆、尿液中载脂蛋白M的含量
4. ELISA检测血浆中相关细胞因子的含量
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mimili_901[使用道具]
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发表于 2013-10-22 17:45 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

本人做的是家蝇的抗菌肽，测序的成功报道不多，G75分离纯化后测其广谱活性，并且最终目的还是测其活性，过去测过几次都不成功，不知哪同学有测序成功经验，多肽测序把握比较大的公司信息。谢谢啦！
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mimili_901[使用道具]
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发表于 2013-10-22 17:45 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

更正上个帖子，最终目的是测出氨基酸序列，哎！
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831226[使用道具]
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发表于 2013-10-22 17:46 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
也来说说哈
我的课题是在经过表面改性的纯钛表面界蛋白质，测试蛋白质的形貌变化，结构变化及结合力
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hustwb[使用道具]
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发表于 2013-10-22 17:47 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
偶是新手,请各位老师指教.
偶做的是HSCs收缩的分子机制,或者分细胞或者用老板的细胞株.
无非就是两三条信号通路的检测,
实验方法有:isometric tension measurement
SDS-PAGE, glycerol-urea PAGE,protein kinase activity assay,
还有可能做 RNAi , 免疫荧光高内涵筛选
看有没有时间喽!
希望多和大家交流!我很喜欢DXY,让我学到很多东西.
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bluelake[使用道具]
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发表于 2013-10-22 17:47 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
俺做的是蛋白质组方面的。
我用的材料是两种不同耐药浓度的细胞系。耐MTX！
对这两种不同浓度的细胞系，进行2D分析。找到这两个细胞的差异表达蛋白。然后分离，鉴定蛋白。找到蛋白后，再进一步分析它与MTX耐药的关系。
方法有，2D，质埔分析，Western－blot
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发表于 2013-10-22 17:47 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

俺也来支持一下版主。
我做的是从一种植物中提取的具有抗癌活性的蛋白质。
当然首先得进行提取分离，由于是从总蛋白中分离，分离就有些难度，至少对我们这儿来说；
然后MTT，进行体外抗癌活性实验，得到IC50值；这方面的数据基本上做完了，做了十来种细胞株。
通过查文献结合实验数据比较，我猜测我们现在做的这个蛋白应该属于RIP（核糖体失活蛋白）。近期我想通过质谱酶解方法测出部分序列。因为到目前还不知道其全序列。如果有这质谱测序方面的高手，帮我给点建议！谢谢。
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owanaka[使用道具]
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发表于 2013-10-22 17:48 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
蛋白质组学是我课题的一个方面：
我的课题：不同的造血微环境对诱导人类胚胎干细胞向造血系统分化的影响
检测方法：
1. 从表面抗原和诱导效率检测三种基质诱导人类胚胎干细胞向造血系统分化的差别
2. 通过基因芯片在基因水平比价三种基质的差别
3. 通过基因芯片的结果，在蛋白质水平找出三种基质的区别
目的：模拟体内造血发生过程，为建立一种稳定高效的诱导体系做基础
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fox_79[使用道具]
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发表于 2013-10-22 17:48 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

我做的是一种药物的抗癌机制
已经完成的工作
（1）筛选合适的药物浓度
（2）MTT法检测药物对癌细胞的抑制效果
（3）PI染色流式细胞仪检测细胞周期的该变，发现药物使细胞停留在G2/M期
药物对肿瘤的抑制包括2方面，一是诱导细胞凋亡，二是抑制细胞分裂，我做的药物主要是第二种机制，接下来的工作：
（1）Western-blotting检测G2/M期相关蛋白（p21,cyclinB,wee 1,cdc25c）看究竟该药物是作用于哪一条信号通路，与G2/M停滞有关的信号有p53依赖性的和p53非依赖性的两种。
（2）如果与p53有关，转染p53野生型和SiRNA的载体，再检测加药后细胞周期的变化。
最终目标：搞清该药物导致细胞停留在G2/M期的分子机制
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xue258[使用道具]
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发表于 2013-10-22 17:48 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

我是做蛋白质的相互作用的，用的而是酵母双杂交
1.先构建一个BAIT质粒
2.将构建的质粒转化进酵母菌株，在和文库进行杂交筛选。
3.筛选到的阳性克隆做生物信息学分析，
4.具体对感兴趣的阳性克隆做具体的相互做用为点的具体定位分析。
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