蛋白质与蛋白组学 » 讨论区 » 经验共享 » 【求助】超滤和过滤技术答疑园地:有问尽管来提

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标题:【求助】超滤和过滤技术答疑园地:有问尽管来提

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发表于 2013-10-25 19:49 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大


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原帖由 ha111 于 2013-10-25 19:45 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')

聚醚砜膜不能高压，那么酒精消毒是否会彻底？有没有细点的指导，比如浸泡的时间，如果需要无菌，不高压灭菌是否影响消毒效果？

大多数的超滤膜不能够耐受高温，所以需要用其他方法进行灭菌。
附件文件推荐用70%酒精消毒，或者某些消毒气体进行灭菌。酒精消毒属于一般消毒，灭菌效果当然不能和高温消毒同日而语。但是就方法而言，该方法确实有效。
也可以考虑用NaOH消毒，但是需要考虑的是材质，不是所有的超滤膜材质都能够达到这样的化学兼容性。
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发表于 2013-10-25 19:50 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大


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原帖由 caihong 于 2013-10-25 19:47 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')
楼主所说 “超滤”和心脏手术中体外循环的“超滤”是否同一概念？如果不是，其各自定义说什么？

原理一样，但是有诸多不同：
1， 应用领域不一样；分别是医学和生命科学；
2，硬件设施不一样；
3， 驱动力不一样；
4，目的不一样；
5，膜不一样；
6， 操作不一样。
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发表于 2013-10-25 19:50 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

请问超滤管接负压抽滤的设备在哪里可以买到？我们这里做纯化的人太多，离心机天天排队用
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发表于 2013-10-25 19:51 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

超滤膜的尺径范围在不同的资料上得到不同的结果，有说100-1nm的；还有的说500-1nm。我做出的膜层在200-300nm 到底是不是超滤膜啊！

请问更加接近真实的超滤膜范围...谢谢了
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发表于 2013-10-25 19:51 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

以前有用过MILLI 30K的，超滤完后发现30K以下的还是很多，理论上是不是30K以下的要基本上滤出？
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发表于 2013-10-25 19:52 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大


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原帖由 c86v 于 2013-10-25 19:50 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')

请问超滤管接负压抽滤的设备在哪里可以买到？我们这里做纯化的人太多，离心机天天排队用

负压抽滤的泵和真空瓶有很多公司可以提供，不知道您要进口产品还是国产产品。您可以和我电邮联系，我给您一些供应商。我得邮箱是wangym@yahoo.cn.
我担心这里给您供应商，有做广告的嫌疑。请谅解。
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发表于 2013-10-25 19:52 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大


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原帖由 小野花 于 2013-10-25 19:51 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')

超滤膜的尺径范围在不同的资料上得到不同的结果，有说100-1nm的；还有的说500-1nm。我做出的膜层在200-300nm 到底是不是超滤膜啊！

请问更加接近真实的超滤膜范围...谢谢了 ...

您的问题很好！很有代表性。这个是关于过滤概念和孔径大小的问题。我下面分别谈谈。
过滤从大类上分为死端过滤（Dead Flow Filtration，DFF)和切向流过滤（，也有叫错流Crossflow Filtration, Tangential Flow filtration，TFF).
死端过滤是一个进口一个出口的过滤方式---所谓死端。从作用上看有澄清，稳定和除菌三种。除菌包括食品饮料行业的除菌（0.45um）， 制药行业注射剂除菌（0.22um）， 除支原体（0.1um），除病毒。这些孔径都是微米级别。
切向流过滤是一进口两出口的方式，出口分别是透过口--小于膜孔的成分的出口， 和回流口--大多数是大于膜孔的成分的出口。所以叫错流或切向流。
根据孔径的大小，切向流分为微滤和超滤2种方式。微滤是微米级别孔径的分离，超滤是分子量级别的分离。
微米大小比较清楚，一般的澄清都是微米级别的。
超滤是分子量级别的，那么如何折算成纳米级别的？这个只能是一个近似的计算，因为蛋白质的分子形状不一样，球形，纤维性状和椭圆形状的差异导致分子大小的差异。如何换算大小就成为麻烦，因为有不确定。大体上---很粗的数据--大约9万分子量相当于1nm。注意这个数据仅供参考啊。
您说的200~300nm，属于微滤范畴， 也就是0.2-0.3um，但是可以用切向流的方式去处理。
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 小中大


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原帖由 了了 于 2013-10-25 19:51 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')

以前有用过MILLI 30K的，超滤完后发现30K以下的还是很多，理论上是不是30K以下的要基本上滤出？

很好的问题，可以解决大家关于截留率的疑问。
对于MWCO 30K的膜，其意义是对于30K的球状目标物质大约有90%的截留。那么如何达到近似100%截留？一般说来，用1/6~1/3目标物质的分子量作为孔径。
同样的，对于希望去除的小分子，孔径也需要选择3-6倍目标物质。当然越小越好！同时我们还有考虑小分子穿过膜的动力学状态，小分子穿膜也有速率的问题。毕竟水分子更快地穿过的。所以有时候为了更好的去除小分子，需要反复的加缓冲液洗滤（Diafiltration）。我曾经试验过氯离子的去除，用1K膜反复洗滤12个周期， 才达到0.1M Ag+检不出。
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发表于 2013-10-25 19:54 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
很好的问题，可以解决大家关于截留率的疑问。
对于MWCO 30K的膜，其意义是对于30K的球状目标物质大约有90%的截留。那么如何达到近似100%截留？一般说来，用3-6倍目标物质的分子量作为孔径。
同样的，对于希望去除的小分子，孔径也需要选择1/6~1/3目标物质。当然越小越好！同时我们还有考虑小分子穿过膜的动力学状态，小分子穿膜也有速率的问题。毕竟水分子更快地穿过的。所以有时候为了更好的去除小分子，需要反复的加缓冲液洗滤（Diafiltration）。我曾经试验过氯离子的去除，用1K膜反复洗滤12个周期， 才达到0.1M Ag+检不出。

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用3-6倍目标物质的分子量作为孔径。-----------------这个说反了吧？？？？？应该是1/6~1/3目标物质

对于希望去除的小分子，孔径也需要选择1/6~1/3目标物质。当然越小越好？？？？？？？？应该是3-6倍目标物质-----不知道我说的对不对，请指教，谢谢！
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发表于 2013-10-25 19:55 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

我想分离两个蛋白，分别大小为22和45kd左右，目标是纯化22kd的，请问我要用多大孔径的膜？
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