小中大想问一下楼主，你的目的和内参都出了没有，我现在遇上了和你一样的情况了，做了好多回了，就是不出，一抗不管是目的还是内参的都没神魔问题，步骤也没发现明显错误，同学用我的内参一抗都出带了，但我的还是不出，急死了
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那你的电泳液、转膜液、配胶、发光剂有问题不？还有你的蛋白的质量？你可以借人家一个孔，跑一下你的蛋白，看看出结果不~要是蛋白没有问题，那就从配胶、电泳液、转膜液、发光剂一步步摸了~可以先自己配一块胶，然后让别人拿他的东西帮你配一块胶，后面就用你的东西做……这样以此类推，知道发现问题~我就这么过来的~祝你好运哈！
