蛋白质与蛋白组学

非常荣幸能有同行者！一个人走的真的很累……
说实话没能理解您“没法放大，无法用于生产”这句的意思。纠缠于这个设计三年多了，该想的也都想过了。
恕在下愚钝，能否解惑？感觉这方法太适合大规模复性生产了，设备基本就跟冰箱差不多……

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要用于生产的放大，不是简单的定性问题。
如果需要实现生产，必须要定量计算，比如复兴率是多少？体系中各物质组分是多少？温度如何控制？时间如何控制？产量得率是多少？是否可稳定重复？整个方法体系的容错性可好？是否可通过计算进行生产前投料预估？如果简单通过冻融的话，室温都可以影响融化速度，不均一体系中固体和液体比例出现的波动，蛋白质和盐离子浓度对复性效率的影响等等都无法精确控制和计算，最后导致很不稳定的批间差，生产就难以正常进行了

要用于生产的放大，不是简单的定性问题。
如果需要实现生产，必须要定量计算，比如复兴率是多少？体系中各物质组分是多少？温度如何控制？时间如何控制？产量得率是多少？是否可稳定重复？整个方法体系的容错性可好？是否可通过计算进行生产前投料预估？如果简单通过冻融的话，室温都可以影响融化速度，不均一体系中固体和液体比例出现的波动，蛋白质和盐离子浓度对复性效率的影响等等都无法精确控制和计算，最后导致很不稳定的批间差，生产就难以正常进行了

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您确实想的非常长远，在下实自愧不如！
之前跟一个做过大规模复性的人交流过，他说从蛋白生产成本角度而言，通过细菌包涵体复性顶多是养细胞获得的一成。不过细菌蛋白有诸多麻烦，例如：内毒素问题，复性率问题，噬菌体问题等等。而内毒素问题使其难以通过SFDA关……这一切都是现实的大麻烦！不过从更宽广的视角看，可能就有另外一种可能。非得做的很纯很高端吗？非得给人注射，过SFDA吗？做工业酶类，环保酶类，即便是做EGF用于化妆品外用可以吧！还有纯化非得放在复性之后，变性态时就走柱子或萃取排除不行吗？……
这些还都是未知数，想来也正是这些未知数才给这个方法以更大的生存空间。当然这一些都需要努力去获得答案。也许最后证明跟反胶团一样用处不大，……这都是后话。

可以解冻上清本身就是溶解的吧，难道用PBS透析再浓缩看看有无沉淀？

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应该在您稀释的时候就能看出端倪，成功复性用缓冲液稀释一般不会出问题，否则就会有沉淀。
具体方法可以抽取几个微升，加到PBS水里，从侧面对光看有没有白色沉淀就行了。