蛋白质与蛋白组学 » 讨论区 » 经验共享 » 【求助】空肠、回肠、胰腺的β-actin表不表达？

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标题:【求助】空肠、回肠、胰腺的β-actin表不表达？

boom[使用道具]
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发表于 2013-11-6 11:17 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

弱弱的补一下，就这个分子，我做骨骼肌的时候，b-actin也不出，后来看了说明书才知道，而且做骨骼肌的时候，其蛋白提取方法不同，貌似得匀浆，我组内实验室的那个匀浆机跟大钻子似的，1.5ml的Ep管放进去，不用说匀浆，直接就没了，大鼠的骨骼肌，能有屁大点当时就这个原因和我老板谈判，瞬间被骂没词儿了，“当时取大鼠各个组织器官的时候，取完就放液氮里了，谁还给你专门就骨骼肌拿出来粉碎啊，匀浆啊，我伺候你啊？谁伺候你啊？哪那么多毛病！'这老板原话，我被瞬间击溃！
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发表于 2013-11-6 11:18 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

弱弱的补一下，就这个分子，我做骨骼肌的时候，b-actin也不出，后来看了说明书才知道，而且做骨骼肌的时候，其蛋白提取方法不同，貌似得匀浆，我组内实验室的那个匀浆机跟大钻子似的，1.5ml的Ep管放进去，不用说匀浆，直接就没了，大鼠的骨骼肌，能有屁大点当时就这个原因和我老板谈判，瞬间被骂没词儿了，“当时取大鼠各个组织器官的时候，取完就放液氮里了，谁还给你专门就骨骼肌拿出来粉碎啊，匀浆啊，我伺候你啊？谁伺候你啊？哪那么多毛病！'这老板原话，我被瞬间击溃！
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发表于 2013-11-6 11:19 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

网页应该能打开的，或者你到别的数据库里找一下资料就好了。小肠不好说，胰腺和胰岛确实是不表达ACTB的, 自然不会有阳性
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kuaizige[使用道具]
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发表于 2013-11-6 11:20 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
弱弱的补一下，就这个分子，我做骨骼肌的时候，b-actin也不出，后来看了说明书才知道，而且做骨骼肌的时候，其蛋白提取方法不同，貌似得匀浆，我组内实验室的那个匀浆机跟大钻子似的，1.5ml的Ep管放进去，不用说匀浆，直接就没了，大鼠的骨骼肌，能有屁大点当时就这个原因和我老板谈判，瞬间被骂没词儿了，“当时取大鼠各个组织器官的时候，取完就放液氮里了，谁还给你专门就骨骼肌拿出来粉碎啊，匀浆啊，我伺候你啊？谁伺候你啊？哪那么多毛病！'这老板原话，我被瞬间击溃！

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骨骼肌里长长的都是a-actin, b-actin能做出才奇怪了...

样本少的话手动匀浆不行么...
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abc816[使用道具]
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发表于 2013-11-6 11:20 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

楼楼 您好，每个样本，我跑western时用蛋白裂解液已经提取了一部分，目前还没有进行下一步处理，正在寻找骨骼肌蛋白提取的资料和文献，剩下的组织不多了，我没敢妄动，还得摸条件合不合适，估计不够我霍霍的。。
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发表于 2013-11-6 11:20 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
不会吧，大家都说骨骼肌中没有beta-actin，那我以前做出来的条带是什么呢？........
大家可以参考下面两篇文献
cuturl('http://www98.griffith.edu.au/xmlui/bitstream/handle/10072/40252/71166_1.pdf?sequence=1')
cuturl('http://ajpendo.physiology.org/content/294/2/E345.full')
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发表于 2013-11-6 11:21 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
不会吧，大家都说骨骼肌中没有beta-actin，那我以前做出来的条带是什么呢？........
大家可以参考下面两篇文献
cuturl('http://www98.griffith.edu.au/xmlui/bitstream/handle/10072/40252/71166_1.pdf?sequence=1')
cuturl('http://ajpendo.physiology.org/content/294/2/E345.full')

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楼楼您好，我跑骨骼肌b-actin跑了2次，几乎不显。。。
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boom[使用道具]
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发表于 2013-11-6 11:22 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

这篇文献里的条带还可以分割开啊，我寡闻了
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zwsyrt[使用道具]
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发表于 2013-11-6 11:27 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大


QUOTE:
原帖由 boom 于 2013-11-6 11:22 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')

这篇文献里的条带还可以分割开啊，我寡闻了

这个确实有点过分，呵呵。不过根据我自己做的和别人做的betaactin肯定是可以再骨骼肌中检测出来的，而且非常非常多。
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boom[使用道具]
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发表于 2013-11-6 11:27 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大


QUOTE:
原帖由 zwsyrt 于 2013-11-6 11:27 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')


这个确实有点过分，呵呵。不过根据我自己做的和别人做的betaactin肯定是可以再骨骼肌中检测出来的，而且非常非常多。  

楼楼您好，是western检测到的吗？ 我查看b-actin说明书貌似有说心肌和骨骼肌不能用b-actin作内参，请问你用的哪个型号哪个公司的b-actin,产品
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