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标题:【求助】空肠、回肠、胰腺的β-actin表不表达?

zwsyrt[使用道具]
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你在muscle里杂出很浓的β-non-muscle actin(beta-actin)条带,不觉得很奇怪吗?

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并不奇怪啊,β-actin是一种广泛存在的细胞骨架蛋白,参与骨骼肌细胞骨架的形成,而你们所认为的a-actin则是形成肌纤维的蛋白,二者都是存在的。
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zwsyrt[使用道具]
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actin大致可分为六种,其中四种是不同肌肉组织特异性的,包括alpha-skeletal muscle actin,alpha-cardiac muscle actin,alpha-smooth muscle actin,和gamma-smooth muscle actin;其余两种广泛分布于各种组织中,包括beta-actin(β-non-muscle)和gamma-non-muscle actin。
各种亚型actin序列间具有高度的同源,你确定你杂出来的是beta-actin,而不是由于抗体原因实际杂出的是alpha-actin?

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你自己的帖子里都说了beta actin是广泛存在于各个组织中的,难道骨骼肌不是很常见的组织么?
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boom[使用道具]
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样品是大鼠组织
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boom[使用道具]
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看了内参大讨论内个帖子了,貌似有说N-末端那个b-actin制品检测不到骨骼肌信号,而c-末端的b-actin制品可以检测到骨骼肌信号,我组内用的是N-末端制品,
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看了内参大讨论内个帖子了,貌似有说N-末端那个b-actin制品检测不到骨骼肌信号,而c-末端的b-actin制品可以检测到骨骼肌信号,我组内用的是N-末端制品,

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没错,b-actin与a-actin在c端具有较高的同源性,因此针对b-actin C端序列制备的抗体是可以同时检测b和a型actin,这类抗体能够检测到骨骼肌中的信号也就不足为奇了,因为那根本是误打误撞的a-actin,这也就是楼上一位战友一再坚持的依据。
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并不奇怪啊,β-actin是一种广泛存在的细胞骨架蛋白,参与骨骼肌细胞骨架的形成,而你们所认为的a-actin则是形成肌纤维的蛋白,二者都是存在的。

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哦?骨骼肌细胞骨架不就是肌原纤维吗?我记得骨骼肌细胞属于特化的细胞。另,"广泛分布"似乎并不能意味着所有组织均有分布。
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zwsyrt[使用道具]
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哦?骨骼肌细胞骨架不就是肌原纤维吗?我记得骨骼肌细胞属于特化的细胞。另,"广泛分布"似乎并不能意味着所有组织均有分布。

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看来您的基本概念有点问题,好好看看细胞骨架的定义吧。如果骨骼肌这种最常见的组织里面都没有的话,他这个广泛分布就不能成立,应该就特别指明出了骨骼肌之外广泛分布,而不是直接说广泛分布。
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看来您的基本概念有点问题,好好看看细胞骨架的定义吧。如果骨骼肌这种最常见的组织里面都没有的话,他这个广泛分布就不能成立,应该就特别指明出了骨骼肌之外广泛分布,而不是直接说广泛分布。

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嗯,好的,我会再好好看看文献,纠正下自己的基本概念。
如果你认为骨骼肌里有b-actin,好的。如果你认为其量非常非常的多,也ok。不过,如果你能向你老板的师弟打听到制备抗体所用的抗原氨基酸序列,就更好了。如果再有心,拿b-Actin和a-actin做个序列比对,就完美了。
如果我对b-actin"广泛分布"的解读与你有异,这可能与我英语水平有限有关,要不你维基百科下actin的说明?
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boom[使用道具]
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楼楼们,有骨骼肌蛋白提取方法么? 成手的偷懒啦
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