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» 【转帖】毕业在即,总结western blot经验
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标题:【转帖】毕业在即,总结western blot经验
am10
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发表于 2013-11-8 11:23
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1.楼主做的17KD的蛋白,为什么转移液不加SDS,如果加了会有什么后果?
2.我做的也是17KD,用0.45的膜,转不上后来才知道要用0.22的膜,可是做了几次,转移的效果都不好,MARKER很难转到膜上?用0.45的膜转30分钟膜已经很漂亮了,0.22的膜转40分钟膜上依稀可见MARKER的条带,胶上的条带却很清楚?
我很着急,做了2个月了,只有内参能够曝出来。木的条带从来没出来过。
恳请楼主多多指教!!
多谢!
birdfish
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发表于 2013-11-8 11:23
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谢谢分享,但今天网络好象不好,不能投票,明天再投,再请请教一个问题,一抗是用杂交液配置的吗?我看到有地方写着是用封闭液配的。
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