液相色谱 » 讨论区 » 分析百问 » 空白血杂质跟主药如何分开

采购询价

点击提交代表您同意 《用户服务协议》 《隐私政策》

 
需要登录并加入本群才可以回复和发新贴

标题:[未解决]空白血杂质跟主药如何分开

  [未解决]本主题悬赏 可用分 10  
chengjia6[使用道具]
VIP群主



UID 30277
精华 15
积分 760
帖子 136
信誉分 170
可用分 922
专家分 56
阅读权限 255
注册 2009-11-25
状态 离线
21
 
楼主,你试下固相萃取,在处理血样这块是不错了,可以省去前处理,

我试验室就经常做这个
本帖最近评分记录
  • miracle   2010-6-9 16:54  可用分  +2   积极应助,辛苦了!
  • miracle   2010-6-9 16:54  专家分  +2   积极应助,辛苦了!
顶部
ll5804[使用道具]
三级
Rank: 3Rank: 3


UID 39737
精华 6
积分 227
帖子 30
信誉分 120
可用分 700
专家分 16
阅读权限 255
注册 2010-6-8
状态 离线
22
 
固相萃取我有柱子但是没有仪器 ,还能怎么做?
顶部
出国吧[使用道具]
一星
Rank: 6Rank: 6


UID 955
精华 5
积分 3012
帖子 797
信誉分 141
可用分 3400
专家分 811
阅读权限 255
注册 2007-12-4
状态 离线
23
 


QUOTE:
原帖由 ll5804 于 2010-6-9 16:02 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')
主要是检测的主药在血浆跟血细胞里面都溶,大约各占50%吧 不稳定 所以只有测全血。处理过程是看了文献综合后的方法 大部分都是这么处理的,现在在尝试流动相中加入磷酸,三乙胺试下 能不能去杂质,实在不行跑梯度,这个波长基 ...

恩,这个波长已到了紫外的截止区了,大部分物质在这里都会有强烈的吸收,所以干扰很大是必然的,你的样品是什么类型的物质?PH值一定要控制好。你设下梯度试一下,原则是让难保留的物质缓慢流出,容易保留的物质快速洗脱除就行。
顶部
358uwcj[使用道具]
五级
Rank: 5Rank: 5


UID 14522
精华 3
积分 2108
帖子 839
信誉分 120
可用分 2720
专家分 329
阅读权限 255
注册 2009-3-27
状态 离线
24
 

回复 #20 ll5804 的帖子

210nm确实基线会比较飘。
固相萃取小柱不用什么仪器设备啊,就是那种针管式的俗称SPE操作也很简单方便,现在卖的厂家也很多,有进口的也有国产的,主要是用来除去血液血浆中的蛋白啦、盐啦以及一些乱七八糟的杂质。
本帖最近评分记录
  • miracle   2010-6-9 18:06  可用分  +3   感谢您的帮助解答!
顶部
ll5804[使用道具]
三级
Rank: 3Rank: 3


UID 39737
精华 6
积分 227
帖子 30
信誉分 120
可用分 700
专家分 16
阅读权限 255
注册 2010-6-8
状态 离线
25
 
分析的主药为多肽类抗生素,现在可以肯定试剂没有干扰,就是血样里的杂质
顶部
thereyoube[使用道具]
一星
Rank: 6Rank: 6


UID 799
精华 29
积分 5843
帖子 1822
信誉分 202
可用分 6936
专家分 1530
阅读权限 255
注册 2007-11-21
状态 离线
26
 
关于血的确实不好分离,况且还是加内标物 的。我刚才看了你的流动相,很少人把乙腈跟甲醇配比然后跟水一起用的吧。你要么选择乙腈跟水,要么选择甲醇跟水配比,直接用水应该也不行,得弄个缓冲液,比如说磷酸一类的,具体的哪一种缓冲液,浓度为多少得看你实验需求。流动相设置一个梯度,这样更利于分离。还有,你进样前有没过滤膜?这个很关键哦。

至于那个检测波长,我以前做实验前查的文献中,所用的检测波长不一,你这方法经过改造的,也不能照搬人家所用的波长,建议你拿到紫外分光那边做个全波长扫描,比较好的吸收波长一目了然。
顶部
358uwcj[使用道具]
五级
Rank: 5Rank: 5


UID 14522
精华 3
积分 2108
帖子 839
信誉分 120
可用分 2720
专家分 329
阅读权限 255
注册 2009-3-27
状态 离线
27
 


QUOTE:
原帖由 ll5804 于 2010-6-9 19:53 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')
分析的主药为多肽类抗生素,现在可以肯定试剂没有干扰,就是血样里的杂质

那样的话选择固相萃取小柱绝对能帮你去除杂质
顶部
ll5804[使用道具]
三级
Rank: 3Rank: 3


UID 39737
精华 6
积分 227
帖子 30
信誉分 120
可用分 700
专家分 16
阅读权限 255
注册 2010-6-8
状态 离线
28
 
那这个固相萃取柱能重复使用吗?实验的重现性跟稳定性怎么样?如果没有固相萃取仪的情况下,怎么设置这个装置?
顶部
ross_racheal[使用道具]
一星
Rank: 6Rank: 6


UID 801
精华 18
积分 3986
帖子 1096
信誉分 178
可用分 4098
专家分 1055
阅读权限 255
注册 2007-11-21
状态 离线
29
 


QUOTE:
原帖由 ll5804 于 2010-6-9 19:53 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')
分析的主药为多肽类抗生素,现在可以肯定试剂没有干扰,就是血样里的杂质

应该是碱性的吧,梯度加阴离子对试剂看看,PH值调到4-5
顶部
实验技术[使用道具]
五级
Rank: 5Rank: 5


UID 2583
精华 8
积分 2566
帖子 599
信誉分 136
可用分 2914
专家分 725
阅读权限 255
注册 2008-3-25
状态 离线
30
 
用洗耳球,加压固相小注上加个注射器,下面用试管等容器接着,上面用洗耳球加压,大体这样是比较简易的方法,你可以试试。

确实应该在样品处理上下些功夫,杂质多大体是处理的问题,当然色谱条件的改变可以分开是最好的。因为没做过此类药物,所以处理上没有更好的建议。用的提取试剂可以用个混合的试试,看看能否有些好转。
顶部