空白血杂质跟主药如何分开 - 分析百问

液相色谱 » 讨论区 » 分析百问 » 空白血杂质跟主药如何分开

35 2/4 ‹‹1 2 3 4 ››

需要登录并加入本群才可以回复和发新贴

打印 | 推荐 | 订阅 | 收藏

标题:[未解决]空白血杂质跟主药如何分开

[未解决]本主题悬赏可用分 10

ll5804[使用道具]
三级
Rank: 3

UID 39737
精华 6
积分 227
帖子 30
信誉分 120
可用分 700
专家分 16
阅读权限 255
注册 2010-6-8
状态离线

发表于 2010-6-8 22:12 资料个人空间短消息加为好友

小中大

样品处理过程如下：取全血1ml置于10ml,加一定量内标，加入NaOH溶液2ml,涡旋2min，加无水乙醚(重蒸）4ml,涡旋5min，3000转每分钟离心15分钟，取乙醚层40度水浴氮气吹干，加入酸化甲醇溶液（盐酸：甲醇=1：3）200微升重组，加正己烷0.5ml涡旋30秒，3000转每分钟离心10分钟，弃去正己烷层去下层清夜20微升进样。
大家看处理过程有什么问题？怎么优化？

本帖最近评分记录

miracle 2010-6-9 10:33 可用分 +2 欢迎朋友回复交流！

uovt69jn[使用道具]
五级
Rank: 5

UID 11240
精华 8
积分 2127
帖子 804
信誉分 133
可用分 2852
专家分 351
阅读权限 255
注册 2008-12-28
状态离线

发表于 2010-6-8 22:29 资料个人空间短消息加为好友

小中大

柱温这么高啊...

改变一下流动相条件，加点酸、碱、或者是四氢呋等试试

gitde[使用道具]
五级
Rank: 5

UID 14083
精华 4
积分 1866
帖子 717
信誉分 121
可用分 2368
专家分 288
阅读权限 255
注册 2009-3-20
状态离线

发表于 2010-6-9 10:13 资料个人空间短消息加为好友

小中大

再降低流动相比例，我有做过一个东西是50：50才分开的，但是出峰确实很慢

本帖最近评分记录

miracle 2010-6-9 10:33 可用分 +3 谢谢您的热心应助！

心情se567[使用道具]
五级
Rank: 5

UID 14676
精华 1
积分 1823
帖子 667
信誉分 117
可用分 2270
专家分 281
阅读权限 255
注册 2009-3-30
状态离线

发表于 2010-6-9 10:13 资料个人空间短消息加为好友

小中大

QUOTE:

原帖由 ll5804 于 2010-6-8 22:12 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')
样品处理过程如下：取全血1ml置于10ml,加一定量内标，加入NaOH溶液2ml,涡旋2min，加无水乙醚(重蒸）4ml,涡旋5min，3000转每分钟离心15分钟，取乙醚层40度水浴氮气吹干，加入酸化甲醇溶液（盐酸：甲醇=1：3）200微升重组，加正己烷0.5ml涡旋30 ...

柱温有必要那么高吗?柱温过高出峰早不易分开！另外查一下试剂会不会引入干扰！

piaoliang110mei[使用道具]
一星
Rank: 6

UID 563
精华 8
积分 3590
帖子 1036
信誉分 152
可用分 3640
专家分 860
阅读权限 255
注册 2007-10-29
状态离线

发表于 2010-6-9 14:01 资料个人空间短消息加为好友

小中大

QUOTE:

处理过程太复杂,重复性会很差;
我读研的时候也是做的兔全血,基本是取血后离心,取上清液即血清部分再用某种有机试剂处理一下,离心,就可以了, 没有整得这么复杂.
你这个处理过程是按某种既定标准(如药典还是客户资料)处理的,还是自己想的?如果是自己想的,建议先看看类似文章再摸索实验条件,想当初我是看了不下100篇的文献的

朋友，常来论坛交流！

kflsjjfdl[使用道具]
一星
Rank: 6

UID 798
精华 21
积分 4494
帖子 1697
信誉分 177
可用分 5845
专家分 984
阅读权限 255
注册 2007-11-21
状态离线

发表于 2010-6-9 14:01 资料个人空间短消息加为好友

小中大

1.关于分离度的问题，是不是考虑把水换成盐呢？

2.我记得原来的公司做狗血样品处理时，是取血后立即去离心，然后再样品处理的。

ngoir[使用道具]
五级
Rank: 5

UID 11246
精华 0
积分 2148
帖子 901
信誉分 119
可用分 2865
专家分 294
阅读权限 255
注册 2008-12-28
状态离线

发表于 2010-6-9 14:02 资料个人空间短消息加为好友

小中大

怎么不考虑走梯度呢？

bing0421gs[使用道具]
五级
Rank: 5

UID 32821
精华 3
积分 1085
帖子 491
信誉分 113
可用分 2042
专家分 118
阅读权限 255
注册 2010-1-21
状态离线

发表于 2010-6-9 14:03 资料个人空间短消息加为好友

小中大

回复 #11 ll5804 的帖子

样品前处理条件挺好的是不酸有些高呀
损害柱子是不大一些

358uwcj[使用道具]
五级
Rank: 5

UID 14522
精华 3
积分 2108
帖子 839
信誉分 120
可用分 2720
专家分 329
阅读权限 255
注册 2009-3-27
状态离线

发表于 2010-6-9 14:03 资料个人空间短消息加为好友

小中大

我看你的处理过程没有使用固相萃取类步骤，有条件可以试试用固相萃取柱前处理一下样品，把杂质除去。不知道你检测血中哪类物质？

ll5804[使用道具]
三级
Rank: 3

UID 39737
精华 6
积分 227
帖子 30
信誉分 120
可用分 700
专家分 16
阅读权限 255
注册 2010-6-8
状态离线

发表于 2010-6-9 16:02 资料个人空间短消息加为好友

小中大

主要是检测的主药在血浆跟血细胞里面都溶，大约各占50%吧不稳定所以只有测全血。处理过程是看了文献综合后的方法大部分都是这么处理的，现在在尝试流动相中加入磷酸，三乙胺试下能不能去杂质，实在不行跑梯度，这个波长基线是不是漂的厉害，固相萃取暂时没仪器做不了啊

35 2/4 ‹‹1 2 3 4 ››

液相色谱

液相色谱 » 讨论区 » 分析百问 » 空白血杂质跟主药如何分开

标题:[未解决] function setanswer(pid){ if(confirm("您确认要把该回复选为“最佳答案”吗？")){ document.delpost.action='misc.php?action=bestanswer&tid=28685&pid=' + pid + '&bestanswersubmit=yes'; document.delpost.submit(); } } 空白血杂质跟主药如何分开

回复 #11 ll5804 的帖子

标题:[未解决]空白血杂质跟主药如何分开