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标题:【求助】18%的Tricine-SDS-PAGE的配方？

guagua[使用道具]
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发表于 2013-11-9 20:44 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

我做了两个多月的ＴＲＩＣＩＮＥ了，出来的效果非常好。
（图在实验室的电脑里，明天贴上来）
用的也是ＢＩＯＲＡＤ的电泳仪，７５ＭＭ，小分子ＭＡＲＫＥＲ是１４－９７Ｋ的，售价我不太清楚，不过可以到问实验室的人员。

５Ｘ的ＬＯＡＤＩＮＧ　ＢＵＦＦＥＲ，溴汾兰。

用新配的阴极和阳极缓冲液，大约跑三小时。

我们实验室都用恒流跑，一块胶２５－３０mA,如果是两块，就用６０，电压调到最大。

在园里有时会看到战友提醒用恒压跑，不可用恒流，因为自己一直是用恒流跑的，而且效果不错，所以真有点胡涂了。
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guagua[使用道具]
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发表于 2013-11-9 20:44 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

法玛西亚的小分子ＭＡＲＫＥＲ，分子量从２Ｋ－１７Ｋ，你可以观注一下。
另外，贴张ＴＲＩＣＩＮＥ的电泳图。供你参考。


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2013-11-9 20:44
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finger[使用道具]
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发表于 2013-11-9 20:45 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
很漂亮的电泳图,能问一下什么是阴极和阳极缓冲液,他们的配方有什么不同?分别加在电泳槽的什么位置?另外除了分离胶和浓缩胶以外,基层胶又是怎么回事?怎么灌胶?问题很菜,但是还是请多多指教!
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发表于 2013-11-9 20:46 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

阴极缓冲液中多了TRICINE和SDS，阴极缓冲液加在内槽，阳极加在外槽。三层胶从下到上依次是分离胶、隔离胶和浓缩胶。
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发表于 2013-11-9 20:47 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
电泳是是个细致工作，从玻璃板的清洗到胶的灌注，都需要很细心才可。关键要靠自己去做，去摸索总结。
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biabiade[使用道具]
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发表于 2013-11-9 20:49 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

这也是我想问的，分子量太小，压不成带啊。
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