液质联用 » 讨论区 » 经验共享 » 提高质谱灵敏度的一般方法

采购询价

点击提交代表您同意 《用户服务协议》 《隐私政策》

 
需要登录并加入本群才可以回复和发新贴

标题:提高质谱灵敏度的一般方法

firefox[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 12
精华 4
积分 831
帖子 268
信誉分 101
可用分 980
专家分 158
阅读权限 255
注册 2007-7-16
状态 离线
11
 
针对于LCMS给几点优化方面的考虑:

1)溶液的流速
ESI的雾化效果与很多因素有关,溶液的表面张力,介电常数,电导率,流速等等,当然,流速的控制是最容易的,在低流速下雾化,易于达到库仑分裂条件,有利于产生气相离子,提高信号的强度。

2)溶剂的表面扩张力
应该知道纯水的表面扩张力很高,故形成Taylor锥以及得到稳定的雾化所需电压就要更高,可能导致放电(特别是负离子模式),如果采用溶剂:水(比如甲醇和水)做溶剂,有利于雾化。

3)待测物质的溶液化学状态
大家都知道,ESI过程是将离子从溶液中转化成气态,所以使待测成分在供试品溶液中成为离子状态,可以提高雾化效率。正对于可以接受质子的待测物质,比如有机碱,可以用极性溶剂比如加入甲酸或乙酸使其呈酸性,可以用正离子模式测定。对于可以解离质子的待测物质,可以加入氨水使其碱化,用于负离子模式测定。

4)另外比如采用表面活性低的缓冲剂,采用低浓度的挥发性酸碱。

5)缓冲盐的影响,常用的乙酸,乙酸氨,碳酸氢氨和甲酸系统,应该尽量采用纯度更高的试剂,最好是能进MS前脱去,以减少背景噪音。

6)喷雾针的位置与电压,以及与样品性质有着关联,这一点不同的MS公司应该都提供了其最好的喷雾针位置的优化方法。

7)对于ESIMS,最高的绝对灵敏度(对于一定的进样量产生最高的信号)是有可能的最低的流速和最小的柱直径下获得。可以使用Nano级的多维HPLC,利用其毛细管色谱柱的分离能力,可以在线脱盐,无需分流的nano级流速可以直接连接纳升级ESIMS,可以极大地提高雾化效率,改善ESIMS的灵敏度。
顶部
dingdang[使用道具]
VIP群主



UID 10
精华 22
积分 1775
帖子 620
信誉分 133
可用分 1937
专家分 326
阅读权限 255
注册 2007-7-16
状态 离线
12
 
仪器的参数、样品的前处理、物质的分离度三者相互影响,个人认为先做样品的前处理,再做分离条件的选择,最后做仪器参数的筛选。
顶部
nanwind_525[使用道具]
三级
Rank: 3Rank: 3


UID 603
精华 1
积分 153
帖子 15
信誉分 103
可用分 696
专家分 11
阅读权限 255
注册 2007-10-31
状态 离线
13
 

补充一点:不要忽视了溶解剂

补充一点:不要忽视了溶解剂。
根据小弟的经验,样本预处理后挥干复溶的溶解剂至关重要,不仅影响峰形还严重影响灵敏度。一般用流动相溶解较好,但也遇到过例外,不得不防。小弟出来乍到,还请各位老师多多指教。
顶部
Neo[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 97
精华 15
积分 827
帖子 278
信誉分 132
可用分 1587
专家分 143
阅读权限 255
注册 2007-8-15
状态 离线
14
 
呵呵,欢迎参加讨论。
顶部
aa_tang[使用道具]
VIP群主



UID 1099
精华 14
积分 5656
帖子 571
信誉分 134
可用分 2764
专家分 1703
阅读权限 255
注册 2007-12-13
状态 离线
15
 

回复 #1 snow_white 的帖子

Sensitivity Enhancement in LC/MS

Our objective is to detail specific techniques to improve analytical response and diminish noise and interferences. We will generally track issues of “cause-and-effect” for each component along of the LC/MS analytical train from sample to detector and give specific alternatives.

I. Optimization of Analyte Response with LC/MS
      A.        Maximizing Analyte Response
                1. Optimization of Ionization
                        a. Factors Affecting Ionization
                                i. Ionization Enhancement
                                ii. Ionization Suppression
                        b. Maximizing Ionization of Targets
                                i. Gas Phase vs Condensed Phase
                2. Evaluating the Specificity of the Target Ion
                3. Evaluating the Polarity of the Target Ion
                4. Evaluating the Stability of the Target Ion
      B. Eliminating Losses in LC/MS
                1. Maximizing Analyte Recovery
                2. Minimizing Source Losses
                3. Minimizing Conductance Losses
                4. Minimizing Transmission Losses
                5. Duty Cycle and Trade-offs
II. Elimination of Interferences in LC/MS
      A. Characterization of Interferences in LC/MS
                1. Spectral Interferences
                2. Chemical Interferences
                3. Physical Interferences
                4. Sources of Noise
      B. Minimization of Spectral Interferences
                1. Sample Prep and Chromatographic Solutions
                2. Ion Mobility Solutions
                3. Mass Spectral Solutions
      C. Minimization of Chemical Interferences in LC/MS
                1. Sample Preparation Solutions
                2. Chromatographic Solutions
                3. Ionization Solutions
      D. Minimization of Physical Interferences
                1. Minimizing Charging and Space-Charge Effects
                2. Minimizing Aerosol Effects
                3. Minimizing Positional Dependence
      E. Minimizing Noise in LC/MS
                1. Eliminating Background Noise
                2. Elimination Source Noise
                3. Statistics and Trade-offs
III. Development of Practical Methods for LC/MS
      A. Protocols for LC/MS Methods Development
                1. Methods for Quantitation
                2. Methods for Target Analysis
                3. Methods for ‘Unknowns’
                4. Sample Preparation Approaches
      B. Characterizing Sample Variability
      C. Characterizing Solvent and Reagent Variability
                1. Solvents for LCMS
      D. Characterizing System Variability
      E. Special Methods for Specific Classes of Compounds
                1. Proteins
                2. Peptides
                3. Amino Acids
IV. Information from LC/MS
      A.        Mass Information
                1. Accurate Mass
                2. Unit Mass
      B.        Structural Information
                1. Isotopic Distribution
                2. Chemical Information
V. Other
      A. Balancing Priorities
                1. Time is Money
                2. Rework is Money
                3. Liability is Money

cuturl('http://ca.pittcon.org/Technical+Program/tpabstra08.nsf/SCoursesByCat/DBEF510F35777C15852573190079C6B1?opendocument')

[ 本帖最后由 aa_tang 于 2008-1-29 20:55 编辑 ]
顶部