谁能告诉我如何分离UTP和UDP-GlcNAc

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标题:[未解决]谁能告诉我如何分离UTP和UDP-GlcNAc

[未解决]本主题悬赏可用分 10

minjun3424[使用道具]
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发表于 2010-6-15 10:55 资料个人空间短消息加为好友

小中大

我想利用C18的柱子分离UTP和UDP-GlcNAc，之前有人用HPLC，以三乙胺-醋酸为流动相能够很好的分离UDP-GlcNAc，为什么我用20mM的三乙胺-醋酸时没有峰呢？

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miracle 2010-6-15 11:05 可用分 +2 鼓励朋友，发起话题讨论！

amelican_beauty[使用道具]
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发表于 2010-6-15 11:37 资料个人空间短消息加为好友

小中大

朋友，色谱柱是同一类型的吗，检测波长设置有没有问题，楼主能不能把信息补充做一点，进的是对照品吗？

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miracle 2010-6-15 11:59 可用分 +3 及时应助解答！

maomi530[使用道具]
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发表于 2010-6-15 13:43 资料个人空间短消息加为好友

小中大

可能性很多，样品浓度、流动相比例、三乙胺-醋酸浓度、检测波长都会影响。

DragonsABC[使用道具]
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发表于 2010-6-15 13:43 资料个人空间短消息加为好友

小中大

楼主，用的是什么检测器

aa_tang[使用道具]
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发表于 2010-6-16 00:55 资料个人空间短消息加为好友

小中大

回复 #1 minjun3424 的帖子

用C18柱分离UTP和UDP-GlcNAc，以三乙胺-醋酸挥发性离子对试剂为流动相，是可以的。从原理上来讲，是利用三乙胺与UTP和UDP-GlcNAc上的P形成离子对，增强保留性。该流动相体系的关键是离子对试剂的浓度和pH值，曾用100mM的三乙胺-醋酸作流动相，同时调pH 7.4 来分离过类似结构的化合物。建议楼主从缓冲液离子强度和pH值来优化色谱条件，同时洗脱梯度起始有机相的比例也很关键。多试试吧。

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miracle 2010-6-16 09:27 可用分 +2 积极帮助解答！端午节快乐！
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thereyoube[使用道具]
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发表于 2010-6-16 10:34 资料个人空间短消息加为好友

小中大

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是正离子状态?如果是负离子状态, 可以试一试降低三乙胺-醋酸的浓度用柱后修饰法.

见到报道2.5.mM的乙酸胺要比20mM 的乙酸胺离子化好. 在ESI离子源中.

另外, 要非常小心用三乙胺, 在正离子状态下, 会严重抑制离子化. 而且TEA用了后, 非常难从系统中除去[102]. 建议轻易不要用TEA. 除非系统只用负离子状态.

entd_jps[使用道具]
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发表于 2010-6-16 10:34 资料个人空间短消息加为好友

小中大

朋友，请确认文献的条件，看看它是不是用的C18柱
以及文献的色谱条件等等

lclong0213ng[使用道具]
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发表于 2010-6-16 10:35 资料个人空间短消息加为好友

小中大

QUOTE:

原帖由 minjun3424 于 2010-6-15 10:55 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')
我想利用C18的柱子分离UTP和UDP-GlcNAc，之前有人用HPLC，以三乙胺-醋酸为流动相能够很好的分离UDP-GlcNAc，为什么我用20mM的三乙胺-醋酸时没有峰呢？

我觉得可能是PH值不对造成的，建议仔细核对。

liuzhikunwq[使用道具]
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发表于 2010-6-17 13:47 资料个人空间短消息加为好友

小中大

文献报道的分离开的用的是什么柱子？

ccf335[使用道具]
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发表于 2010-6-17 13:47 资料个人空间短消息加为好友

小中大

“之前有人用HPLC，以三乙胺-醋酸为流动相能够很好的分离UDP-GlcNAc，为什么我用20mM的三乙胺-醋酸时没有峰呢？ ”

那之前用的是什么浓度呢？

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标题:[未解决] function setanswer(pid){ if(confirm("您确认要把该回复选为“最佳答案”吗？")){ document.delpost.action='misc.php?action=bestanswer&tid=29006&pid=' + pid + '&bestanswersubmit=yes'; document.delpost.submit(); } } 谁能告诉我如何分离UTP和UDP-GlcNAc

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