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标题:【讨论帖】于蛋白电泳问题总结

fqswdzd[使用道具]
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可是具体如何操作呢?
割胶,然后透析?
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avi317[使用道具]
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回收是可以,复性恐怕就难咯.
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66+77[使用道具]
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在凝胶中复性是可以做到的。用2.5%triton x-100 洗脱45分钟X2,即可将SDS洗脱出来。可以试一试。先回收再复性的方法我就不太清楚了。
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am10[使用道具]
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以前好象有个师兄做过。割胶,打碎,装在透析袋中,低温电泳,在离心取上清,具体的我没做过。希望对你有帮助。
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有的蛋白可以复性,方法是用将胶在2.5%triton x-100 沁泡1小时,37度摇荡。然后在缓冲液中泡1小时,37度摇荡,再上样前不能加热。不过,只有很少一些蛋白可以复兴,最好的办法环视跑活性电泳,不加SDS
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fqswdzd[使用道具]
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十、用什么方法保存二维电泳SDS胶?

请教各位高手用什么方法保存二维胶比较好,最长能保存多久?胶存放久了对后面的质谱分析有什么影响?先谢谢了!
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vcve[使用道具]
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我们主要用的是配制的保存液
乙醇 75ml
甘油 11.5ml
双蒸水 定容至250ml
一般对质谱影响不大,具体没作对照研究,但是保存1-2个月后作质谱,效果还可以。
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fqswdzd[使用道具]
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十一、SDS聚丙烯酰胺凝胶的干燥保存方法

请问各位是怎么把SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳后染色的凝胶干燥后保存的?没做过,很疑惑.盼复,谢谢!
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mimili_901[使用道具]
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有专门的干胶仪,把胶夹在两层滤纸里,放干胶仪的一块光板上,上面盖上,然后打开就会加热,胶就干了,跟纸一样,夹在书里就可以了。
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dotaaa[使用道具]
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if你没有干胶仪的话,我推荐你个很好用的方法(以前在公司跑完的胶都这么保存)!
1、你可以割两块一样大的玻璃;
2、四个大点的“夹子”(以前,金属的,带弹簧的,用手指捏,很有劲的那种就可以。);
3、四个铝合金的“┒”形状的,和玻璃的边缘差不多的小条;
4、一张玻璃纸;
5、在水盆里把玻璃纸预泡15min,(记得在水盆里呀,否则,不好弄,)把玻璃纸在玻璃上铺平,把胶放上,玻璃纸折回,把胶覆盖,记得赶尽气泡(很重要哦);
6、用夹子夹起四周,放他一天左右就干了,如果熟练的话,包的好的话,一点也不裂,可以夹到实验记录里。

适合没扫描仪,无干胶仪的朋友!
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