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我看过他们的贴子,你可能没有理解透彻:
1、电泳用的缓冲液可以是你即将要用的缓冲液,或者是使你的蛋白质稳定的缓冲液,缓冲液的量应该是使得胶完全被浸盖,不宜太多。
2、染色的只是你胶的一个很小的部分(一个电泳条带),目的是为了指导你切取其他电泳带的相应目的条带位置,而不是全部染色。
3、我觉得最后的保存缓冲液可以根据你的需要更换,也可以冻干等等,即可以按照蛋白纯化产品同样的方法处理。
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1.电泳用的缓冲液就是电泳缓冲液。
2.部分切胶染色,头疼的问题是染色和脱色时胶会缩小,这样就不容易对齐,容易切错位置,如果分离胶短,就更容易切错!当然可以用水泡使其涨大,注意要及时终止。我现在用的一种方法是,整块胶染色切下目的条带,洗脱后将染色的目的蛋白洗脱液再次直接上样电泳,之后部分切胶染色(步骤同第一次),染色后对齐切胶,因这次蛋白较纯,可以切宽一点, 即使稍不对齐, 也不影响蛋白纯度。第二次电泳后考马斯亮蓝染料就和蛋白分离了。