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标题:【求助】蛋白质加甘油如何保存

lixi559[使用道具]
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发表于 2013-11-21 21:50 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

【求助】蛋白质加甘油如何保存

小弟提的混合蛋白质溶液，放在－80度数月后降解厉害。听说加甘油可以保持活性，所以加了20％的甘油（v/v，甘油未高压）。有人说加了甘油的只能放在－20度，但是我还是不太放心，想放在－80度，请大家指点可否？甘油的比例是否合适？
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发表于 2013-11-21 21:50 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大


QUOTE:
原帖由 lixi559 于 2013-11-21 21:50 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')
小弟提的混合蛋白质溶液，放在－80度数月后降解厉害。听说加甘油可以保持活性，所以加了20％的甘油（v/v，甘油未高压）。有人说加了甘油的只能放在－20度，但是我还是不太放心，想放在－80度，请大家指点可否？甘油的比例是否合适？ ...

放-80没有任何问题，绝对要比放在-20效果好。

原则上甘油的比例从5%~50%不等，根据你要存放的时间而定，我当时加的是30%的甘油，从春节的时候到现在浓度基本上下降了一半，总体来说效果还比较满意。

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lixi559[使用道具]
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发表于 2013-11-21 21:52 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

回复 #2 iii_ii 的帖子

你说得“浓度下降一半”，是指蛋白得浓度还是甘油得浓度？
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wu11998866[使用道具]
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发表于 2013-11-21 21:52 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大


QUOTE:
原帖由 lixi559 于 2013-11-21 21:52 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')
你说得“浓度下降一半”，是指蛋白得浓度还是甘油得浓度？

蛋白浓度下降一半。BCA试剂盒测的，不一定准，但是确实是下降了，因为page看的出条带明显变浅了，降解还跟不同的蛋白有关系，比如说我的蛋白保存条件就和你的可能不一样。但是我想加了甘油肯定是比不加效果要好的。
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lixi559[使用道具]
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发表于 2013-11-21 21:52 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

相关疾病：
头痛
谢谢！我也有同感！4月份提的蛋白，直接放－80，上个月拿出来BCA都快测不到了。看来蛋白的保存真是很头痛啊！
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xevin[使用道具]
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发表于 2013-11-21 21:53 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
我有些问题，甘油的浓度怎么定？用时甘油怎么除去？有没有相关文献资料，非常感谢。
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xevin[使用道具]
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发表于 2013-11-21 21:54 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

还有，甘油怎么除去？
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发表于 2013-11-21 21:54 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

你下游打算干什么？我们都不去除甘油了。对于ELISA无影响。对免疫，暂时也没发现影响
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发表于 2013-11-21 21:55 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
我有些问题，甘油的浓度怎么定？用时甘油怎么除去？有没有相关文献资料，非常感谢。如果方便我的邮箱是yangbo.198769@163.com,希望能够提供帮助

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http://blog.sina.com.cn/s/blog_721358b20100x10p.html
可以看看这篇博文
甘油不用除去吧，很多抗体公司的抗体都含有甘油的。
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xevin[使用道具]
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发表于 2013-11-21 21:55 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大


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原帖由 gmjghh 于 2013-11-21 21:55 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')
我有些问题，甘油的浓度怎么定？用时甘油怎么除去？有没有相关文献资料，非常感谢。如果方便我的邮箱是yangbo.198769@163.com,希望能够提供帮助

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cuturl('http://blog.sina.com.c') ...

谢谢您的回复，我做的是膜蛋白，甘油会不会影响呢？我刚接触这块，不太清楚，请前辈们指点
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