小中大也说下我们做wb的经验
1 提蛋白还是买成品的裂解液,国产的就行,1ml也就1块左右,效果一般好过自己配的
2 各种液体配置成高浓度的储备液,4度储存,前一天配好胶,4度过夜,第二天跑,加预染marker。电泳内液换新的,外液回收(一周),转膜液提前配置(消泡沫),不回收。
3 切胶转膜的时候依据marker条带,都用尺子量一下,NC膜还比较省
4转完立春红染一下,不过染不出来也不一定没有。立春红可以配成10*放起来,室温就行。1*工作液也可以反复用
5封闭用的奶粉可以用试剂公司的那种,比超市买来可以喝的那种好些,浓度也不用太大,5%就成
6孵育抗体的时候用过手套、自封袋来裁成和膜大小相称的小袋,也用过封口膜反贴,没回收过抗体。感觉要是说省还是反贴,不过要是一次做很多个样,然后膜比较长,冰箱里面不平可能效果就会比较差,一般就是有几个泳道的出不来,不过预试还比较省,条件摸差不多了再封袋子
7定影显影都买的是特便宜的照相馆用的那种,1L七八块,配好了都放在棕色瓶里,临用前倒出来,用完回收,定影用的久些,显影差不多也可以用三四周