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标题:【讨论帖】我在SDS-PAGE中所犯的错误

6327555[使用道具]
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发表于 2013-12-12 16:31 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大


QUOTE:
原帖由 kuohao17 于 2013-12-12 16:28 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')
1。可用聚丙酰胺快速胶（加大AP和TEMED的浓度）封底；
2。AP -20C分装保存，可至3个月；
3。做好分离胶后，要小心地用水封，避免空气影响胶的聚合；
4。细菌沉淀加1XBuffer，可溶性样品加2XBuffer，煮5min，上样10-20ul；
5。剥胶用Bio-Rad的 ...

TEMED可以加倍，只要在10ul以下，AP可以加二到三倍。
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6327555[使用道具]
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发表于 2013-12-12 16:33 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

有个师兄做了块尽一平米的胶，他狂加TEMED与AP，疯狂，不过很有效。
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zwsyrt[使用道具]
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发表于 2013-12-12 16:33 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大


QUOTE:
原帖由 6327555 于 2013-12-12 16:33 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')

有个师兄做了块尽一平米的胶，他狂加TEMED与AP，疯狂，不过很有效。

有什么用处？怎么跑呀？
pfpf
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6327555[使用道具]
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发表于 2013-12-12 16:34 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

回复 #23 zwsyrt 的帖子

他是法医的，好象用来做分析吧，具体我也不是很清楚
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发表于 2013-12-12 16:35 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大


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原帖由 6327555 于 2013-12-12 16:34 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')
他是法医的，好象用来做分析吧，具体我也不是很清楚

弓虽！
请问他是用什么板配的？多厚？是不是要跑双向？
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发表于 2013-12-12 16:35 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
如果有条件，可以用Bio-rad的电泳仪，就不用封了，非常方便。

至于APS可以先配好，放到-20度冰箱冻存。
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发表于 2013-12-12 16:36 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

请问跑小肽分子，除了加甘油及胶浓度还有哪些好办法？能否具体提供帮助？谢谢了
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kuaizige[使用道具]
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发表于 2013-12-12 16:36 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

我也是第一次做，我用的是BIO-RAD0.75mm,想请教大家加样时用什么东西加呢？用微量进样器吗？我把tip头前面加了个6号半针头可以伸到孔底，可是一加样就向两侧的孔溢出去，害得我每加一个样都要洗半天旁边的孔：（（
另外跑出来的条带总是有些歪斜，是什么原因呢？好的电泳跑的时候染料带是什么形状呢？
还有我用的12%的分离胶感觉看胶时很容易卷曲，不知道哪里出了问题。
谢谢各位指教啦。
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kuaizige[使用道具]
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发表于 2013-12-12 16:36 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

另：不好意思，请教AP是什么东西的缩写啊？（汗颜）
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linlinstar[使用道具]
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发表于 2013-12-12 16:37 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大


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原帖由 kuaizige 于 2013-12-12 16:36 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')

另：不好意思，请教AP是什么东西的缩写啊？（汗颜）

应该是过硫酸铵，但我知道另外有种缓冲液的缩写也是AP。
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