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标题:【讨论帖】我在SDS-PAGE中所犯的错误

+小生怕怕+[使用道具]
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发表于 2013-12-12 16:46 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

谢谢您的指教。我又做了一次，速度加快了不少，封水时动作轻些，胶凝得很好。
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mimili_901[使用道具]
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发表于 2013-12-12 16:46 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
相关疾病：
头痛

我刚进实验室,近一周做SDS-PAGE时也遇到了头痛的问题:分离胶凝后总是双层,上层大约2mm;跑胶时在染色带前总出现一条很细的条带,不知是何缘故?

跑胶时在染色带前总出现一条很细的条带,不知是何缘故?
这个问题是怎么回事啊，我在实验中也出现这些细的条带，不知道该当何解释？
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PINK[使用道具]
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发表于 2013-12-12 16:47 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
分离胶凝后为双层,我作实验没有遇到过.会不会是gel solution没有配好.

跑胶时出现的细条带是不是小分子条带?
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33号[使用道具]
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发表于 2013-12-12 16:48 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

胶所用的浓度可根据<分子克隆实验指南>中的分子量而定，一般情况尽量将目的条带放在范围中间，这样跑出的带很好，还要注意电压，但我们有时从头到为都用200v效果也很好，可以试试
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linlinstar[使用道具]
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发表于 2013-12-12 16:49 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
很奇怪，我同学灌的分离胶就没有分层的情况发生，不过他的胶是0.5mm的，会不会跟胶的厚度还有关系
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发表于 2013-12-12 16:49 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

上样液好像至少是2倍的，最终使加样时样品向孔内沉降，不大会出来的。

别的感觉就是按照书上的就可以，关键时缓冲液要时新的
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linlinstar[使用道具]
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发表于 2013-12-12 16:50 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
我今天灌分离胶之前，将它复温至室温，结果未出现分层的情况，我想大概胶的温度很重要吧
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发表于 2013-12-12 16:50 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大


QUOTE:
原帖由 linlinstar 于 2013-12-12 16:50 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')
我今天灌分离胶之前，将它复温至室温，结果未出现分层的情况，我想大概胶的温度很重要吧

灌分离胶之前？？

应该什么分层呀？
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linlinstar[使用道具]
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发表于 2013-12-12 16:50 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
将分离胶gel solution 复温至室温后使用可以避免分离胶聚合后出现分层.
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linlinstar[使用道具]
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发表于 2013-12-12 16:51 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

遇到一怪事：电洗脱后的蛋白SDS-PAGE，银染后发现蛋白泳道呈金黄色，而其他区域背景是棕色，不知是何原因，各位高手请指教！
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