小中大是否可以衍生后再测,我们遇到这类产品都是这样解决的,给你看哈我们的方法。
仪器设备
Agilent 1100或相当的仪器,紫外检测器
抽滤装置(微孔滤膜为0.45um) 超声波清洗器 电子天平(十万分之一)
试药和试剂
水:超纯水 乙腈:色谱纯 磷酸二氢钠:分析纯 磷酸:色谱纯
氯甲酸苄酯:分析纯 X对照品 X对应异构体对照品
溶剂
乙腈
流动相A的配制(20mMNaH2PO4(PH=3.0):乙腈=830:170)
准确称取2.40g±0.01g磷酸二氢钠至装有1000ml水的1000ml试剂瓶中,溶解摇匀,用
磷酸调节PH=3.0±0.1g,再量取该溶液830ml与170ml乙腈混匀,抽滤,超声15min,即
得。
流动相B的配制
乙腈
色谱柱预处理:
用20%乙腈水溶液冲洗柱子15min-20min,然后再使用流动相冲洗色谱柱至基线平衡方可
使用。
系统适用性溶液:
准确称取X对照品25mg±5mg和2mg±1mgX对应异构体对照品至50ml具塞锥
形瓶中,再加入乙腈,使之配成1.0mg/ml的溶液。
按照下式计算所需加入的氯甲酸苄酯的量
V=(ms+mr)×1.4
V ——应量取的氯甲酸苄酯的量(μL)
ms——称取的X对照品的重量(mg)
mr——称取的X对映异构体对照品的重量(mg)
使用100uL注射器加入上式计算所需的氯甲酸苄酯,盖上瓶塞,常温下搅拌20min后,作
为系统适用性溶S。
供试品溶液的配制
准确称取供试品25mg5mg至50ml具塞锥形瓶中,再加入乙腈,使之配成1.0mg/ml的
溶液。
按照下式计算所需加入的氯甲酸苄酯的量
V=m×1.4
V ——应取的氯甲酸苄酯的量(μL)
m——称取的供试品的重量(mg)
使用100uL注射器加入上式计算所需的氯甲酸苄酯,盖上瓶塞,常温下搅拌20min后,作
为供试品溶液A1,同法在配制供试品溶液A2。
注意:量取过氯甲酸苄酯的注射器需立即用甲醇清洗。
色谱条件
色谱柱:Chiralcel OJ-RH 4.6mm×150mm,5μm
检测器:紫外检测器 检测波长: 210nm
柱温:40.0℃ 流速:1.0mL/min 进样量:10μL
采集时间:72min
流动相梯度:
时间(min) 流动相A(%) 流动相B(%)
0.0 100 0
50.0 100 0
51.0 25 75
61.0 25 75
62.0 100 0
72.0 100 0
按进样序列表进样
进样溶液 进样针数 目的
空白(稀释液) 不小于1 确定无影响主峰及杂质峰存在
系统适用性溶液S 2 确定K108峰保留时间,2针峰面积的RSD
不得大于2.0%,K108主峰与对映异构体峰
之间最小分离度应不小于1.5
供试品溶液A1 1 测试样品中X的光学含量
供试品溶液A2 1 测试样品中X的光学含量