小中大血清样品本来就是比较难跑的,你这样的图也不算很差,不过有如下一些意见和建议供参考:
1,SDS-PAGE跑得时间不够,可以再跑一段时间,让蛋白整体向下跑一点,另外,可以更改一下SDS-PAGE的浓度,将浓度调低一些,因为你有很多的大分子量的蛋白。
2,提取血清蛋白一般都会用试剂盒去除高丰度蛋白的,你再摸索一下,用哪个厂家的产品比较好?该如何操作?减少高丰度蛋白去除柱的上样体积,使充分去除高丰度蛋白,在这一方面,不要太计较费用,一定要保证质量,你以后需要做鉴定的话,我给你推荐一个比较好的单位,费用也就省下来了。
3,聚焦时间还要加长,可以把你的聚焦程序修改如下:
1 S 50v 10-12H
2 S 100V 1H
3 S 200V 1H
4 S 500V 1H
5 S 1000V 1H
6 G 8000V 1H
7 S 8000V 最少13小时(约为104000Vhours)
8 S 500维持
祝好!